細胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介：X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑，溶于80%乙醇中，經(jīng)0.2μm濾膜過濾，然后封裝于玻璃小瓶中，適用于細胞分析的多種實驗。優(yōu)勢：1.具有細胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細胞存活率高，生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間，只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進行簡單稀釋，再與質(zhì)粒DNA共同孵育，即可直接向細胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化誰來拯救我的細胞之QIAGEN轉(zhuǎn)染試劑.上海國產(chǎn)轉(zhuǎn)染試劑購買

細胞轉(zhuǎn)染如果以上都沒有問題，那么******重要的環(huán)節(jié)就是慢***質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293T細胞了，轉(zhuǎn)染效果直接影響著出毒效率，那么一款好的轉(zhuǎn)染試劑在此時就是至關(guān)重要了！在這里給大家推薦一款性價比超高的轉(zhuǎn)染試劑，美國Polysciences家的PEIMAX40K！PEIMAX40K（也稱為游離堿PEI22K）是一種功能強大，值得信賴且經(jīng)濟高效的瞬時轉(zhuǎn)染試劑。在HEK293和CHO表達系統(tǒng)中，能在96孔板至100L生物反應(yīng)器范圍內(nèi)提供始終如一高效的基因表達。越來越多的研究人員和公司使用PEI來替代其他類型轉(zhuǎn)染試劑，以獲得他們所需要的優(yōu)勢。相較于其他類型轉(zhuǎn)染試劑，使用自行制備的PEI轉(zhuǎn)染試劑可以使總轉(zhuǎn)染成本降低高達40％左右。ThomasM，etal（2005）研究數(shù)據(jù)表明，去乙?；腜EI40000（PolyethylenimineMAX40000）體外質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率提高21倍，小鼠體內(nèi)靶向效率達到10000倍，隨之肺部特異療效顯示增強1500倍。非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑作用各種轉(zhuǎn)染試劑成分分析.

原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖。因此，它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細胞系，它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后，原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命（即它們是有限細胞系），且隨著傳代的進行，具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據(jù)支配地位，從而造成了細胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對來說，這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便，尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。

產(chǎn)生慢***的比較

通過 LipoD293? 試劑（升級版）和 Lipofectamine LTX（LTX）試劑將三個 cDNAs 共轉(zhuǎn)染進 293T 細胞。一個 GFP 載體，pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用來測定慢***的滴度。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 細胞，其次是分別添加不同量的慢定都上清液，1 微升（上圖）和 10 微升（下圖）。

5 天后，細胞通過流式細胞儀檢測。右上角的數(shù)字表明轉(zhuǎn)導(dǎo)的細胞的百分比來測定慢***的滴度。由 LipoD293? and LTX 產(chǎn)生的慢***的滴度被量化，分為是 8x10^6 和 3x10^6 tu/ml 。 研發(fā)合成的針對siRNA、microRNA、mimic、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的轉(zhuǎn)染試劑。

LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑 LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑具有以下幾個優(yōu)點：高轉(zhuǎn)染效率，適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染前無需去除細胞培養(yǎng)基或血清轉(zhuǎn)染后無需清洗細胞或更換培養(yǎng)基

1轉(zhuǎn)染效率高，適用于多種細胞系圖1. LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑以綠色熒光蛋白（GFP）表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染幾種常見細胞系，通過檢測GFP信號比較轉(zhuǎn)染效率。

2細胞毒性低圖2.LipoFectMax? ，LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉(zhuǎn)染操作，通過計算轉(zhuǎn)染后的細胞存活率比較細胞毒性。 轉(zhuǎn)染試劑實現(xiàn)了更高的有效***細胞/未轉(zhuǎn)染細胞比率，超過其他RNAi試劑。Opti-MEM轉(zhuǎn)染試劑對照

連續(xù)細胞系具有無限增殖的潛能，通常要比原代或有限細胞更易處理.上海國產(chǎn)轉(zhuǎn)染試劑購買

對 HepG2 細胞轉(zhuǎn)染效率的比較

右圖：使用以上轉(zhuǎn)染試劑將 GFP 的 cDNA（pEGFP-N3）按照生產(chǎn)商的提供的轉(zhuǎn)染步驟轉(zhuǎn)染到 HepG2 細胞（在膠原預(yù)處理的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)）。在轉(zhuǎn)染 48 小時之后，用流式細胞儀檢測 GFP 陽性細胞（%）和熒光強度。

左圖：血清和***存在的條件下能提高 LipoD293 試劑（升級版）對在 HepG2 細胞的轉(zhuǎn)染效率。通過三種不同的條件下轉(zhuǎn)染 HepG2 細胞（生長在膠原處理的培養(yǎng)皿上）---無血清和***，10% 血清和***的存在，轉(zhuǎn)染 5 小時后換液和不換液。

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