轉染 48 小時后,使用尼康熒光顯微鏡 GFP 熒光進行成像(左側四幅圖),A:LipoD293; B:293fectin;C:Xfect 和 D:Fugene 6. 帶有 6xHis 標記的 GFP 熒光蛋白使用 Ni-NTA 親和柱技術實現(xiàn)分離。5 微升洗脫液載入 SDS-PAGE 凝膠電泳分離并進行 Coomassie 亮藍染色(右上圖 E),道 1 為 LipoD293293、道 2 為標準蛋白分子、道 3 為 Xfect、道 4 為 293fectin 和道 5 為 Fugene 6。這四種轉染試劑產生蛋白質的效率被進一步定量(見右下圖 F)。產生慢***的比較
通過 LipoD293? 試劑(升級版)和 Lipofectamine LTX(LTX)試劑將三個 cDNAs 共轉染進 293T 細胞。一個 GFP 載體,pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用來測定慢***的滴度。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 細胞,其次是分別添加不同量的慢定都上清液,1 微升(上圖)和 10 微升(下圖)。 帶你了解性價比比較高的轉染試劑-PEI轉染.上海動物細胞轉染試劑原理
細胞轉染過程:X-tremeGENE9DNA轉染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉染試劑是脂質和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優(yōu)勢:1.具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉染試劑進行簡單稀釋,再與質粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化原代細胞轉染試劑推薦該試劑可將RNA導入多種細胞系,包括原代細胞和懸浮細胞.
基于陽離子聚合物的轉染試劑,帶正電的聚合物與核酸帶負電的磷酸基團形成帶正電的復合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用,并通過內吞作用進入細胞。其又分為樹枝狀陽離子聚合物和線性陽離子聚合物兩類,前者細胞毒性相對較大,后者細胞毒性較小,但其轉染效率都高于脂質體轉染,適用也較為廣范。以上單一成分的轉染試劑或聚焦于提高效率或著重于降低細胞毒性,可謂魚和熊掌不可兼得也。新一代轉染試劑,不局限于單一成分,混合了不同 配方的脂類(非脂質體)、加上蛋白質組分、以及各種的 成分,兼具了轉染效率高和細胞毒性小的優(yōu)勢,且操作更加簡單,易于高通量。
十全十美難,十全九美卻可以通過選擇一款好的轉染試劑來實現(xiàn)。理想的轉染試劑包括要具有較高的轉染效率,細胞毒性低,操作簡單可重復,價格還要可愛?,F(xiàn)在大多數(shù)實驗室用的是脂質體系列轉染試劑,但脂質體對細胞毒性大,某些細胞的轉染效率還很低,看單孔的價格也很不美好。尤其是在轉染RNA方面,脂質體的劣勢較明顯。QIAGEN在轉染試劑領域的研發(fā)思路與其核酸純化領域的精而專,全而深不同。在轉染試劑的研發(fā)過程中,另辟蹊徑,研精致思進而做到小而美的轉染產品。從市面上眾多轉染試劑的一片紅海中,神奇的開辟出一塊藍海,為客戶烹制出了幾款高效、快速、低毒又親民的轉染試劑私房菜。從而造成了細胞群內的基因型和表型接近一致的情形。
LipoFectMax?轉染試劑 LipoFectMax?轉染試劑具有以下幾個優(yōu)點:高轉染效率,適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉染轉染前無需去除細胞培養(yǎng)基或血清轉染后無需清洗細胞或更換培養(yǎng)基
1轉染效率高,適用于多種細胞系圖1. LipoFectMax?轉染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達質粒轉染幾種常見細胞系,通過檢測GFP信號比較轉染效率。
2細胞毒性低圖2.LipoFectMax? ,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉染操作,通過計算轉染后的細胞存活率比較細胞毒性。 pei轉染試劑說明書是什么?原代細胞轉染試劑多少錢
給你選擇CycloFect轉染試劑的五大理由!上海動物細胞轉染試劑原理
細胞轉染過程:X-tremeGENE9DNA轉染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉染試劑是脂質和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優(yōu)勢:1.具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉染試劑進行簡單稀釋,再與質粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力上海動物細胞轉染試劑原理