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上海陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑推薦

來源: 發(fā)布時(shí)間:2022-10-20

圖7.對(duì)注射了Invivofectamine3.0試劑的小鼠樣品進(jìn)行血液化學(xué)分析。將Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的AmbioninvivosiRNA的復(fù)合物分別以1mg/kg[1],3mg/kg[3],或未處理[U]的劑量注射入小鼠體內(nèi)。在注射后2、24及48小時(shí)收集血液樣品,并通過臨床化學(xué)檢測方法對(duì)數(shù)個(gè)生物標(biāo)志物(Antech)進(jìn)行評(píng)估。結(jié)果表明在使用Invivofectamine3.0試劑進(jìn)行轉(zhuǎn)染的每個(gè)個(gè)體間所檢測的生物標(biāo)志物的水平與未注射該試劑的個(gè)體相比并沒有***差異。除了以上兩種于siRNA的轉(zhuǎn)染試劑,還有通用型轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine?2000,Lipofectamine?3000和Neon?轉(zhuǎn)染系統(tǒng)也可以用于siRNA轉(zhuǎn)染一般會(huì)同時(shí)設(shè)置對(duì)照,對(duì)RNAi結(jié)果進(jìn)行比較。RNAi的成功取決于正確導(dǎo)入合適量的siRNA,達(dá)到比較大預(yù)期反應(yīng)。上海陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑推薦

基于磷酸鈣成分的轉(zhuǎn)染試劑,其主要作用原理是與DNA通過沉淀反應(yīng)形成磷酸鈣-DNA復(fù)合物,粘附到細(xì)胞膜表面,借助內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)。pH值,鈣離子濃度,DNA濃度,沉淀時(shí)間,細(xì)胞孵育時(shí)間乃至各組分加入順序都可能對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響,因此實(shí)驗(yàn)條件摸索和優(yōu)化時(shí)間較長,且重復(fù)性不佳?;谥|(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑包括中性脂質(zhì)體和陽離子脂質(zhì)體兩種。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA,借助脂質(zhì)膜將DNA導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi)。目前應(yīng)用比較***的是帶正電的陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑,DNA并沒有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中,而是帶負(fù)電的DNA自動(dòng)結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上,形成DNA-陽離子脂質(zhì)體復(fù)合物,從而吸附到帶負(fù)電的細(xì)胞膜表面,經(jīng)過內(nèi)吞被導(dǎo)入細(xì)胞。此方法操作簡單,重復(fù)性好,在體外轉(zhuǎn)染中有很高的效率,但具有一定的細(xì)胞毒性,可能會(huì)干擾細(xì)胞的代謝。且活性受血清影響,需要去除血清。病毒轉(zhuǎn)染試劑哪種好細(xì)胞培養(yǎng)系列 | 專為 293T 優(yōu)化的轉(zhuǎn)染試劑 Nano293T.

LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑具有以下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn):高轉(zhuǎn)染效率,適用于多種細(xì)胞系對(duì)細(xì)胞毒性低適用于DNA和RNA的轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染前無需去除細(xì)胞培養(yǎng)基或血清轉(zhuǎn)染后無需清洗細(xì)胞或更換培養(yǎng)基1轉(zhuǎn)染效率高,適用于多種細(xì)胞系圖1.LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染幾種常見細(xì)胞系,通過檢測GFP信號(hào)比較轉(zhuǎn)染效率。2細(xì)胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對(duì)A549細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作,通過計(jì)算轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞存活率比較細(xì)胞毒性。

細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細(xì)胞分析的多種實(shí)驗(yàn)。優(yōu)勢:1.具有細(xì)胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率高,生成可信任的生理學(xué)相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時(shí)間,只需對(duì)X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行簡單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細(xì)胞添加反應(yīng)混合物(有無血清均可)。3.對(duì)于常用細(xì)胞無需進(jìn)行費(fèi)時(shí)費(fèi)力的優(yōu)化工作.所見即所得——分享兩款超好用的轉(zhuǎn)染試劑,拯救你的細(xì)胞.

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在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系。上海陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑推薦

對(duì)HepG2細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較右圖:使用以上轉(zhuǎn)染試劑將GFP的cDNA(pEGFP-N3)按照生產(chǎn)商的提供的轉(zhuǎn)染步驟轉(zhuǎn)染到HepG2細(xì)胞(在膠原預(yù)處理的培養(yǎng)皿中培養(yǎng))。在轉(zhuǎn)染48小時(shí)之后,用流式細(xì)胞儀檢測GFP陽性細(xì)胞(%)和熒光強(qiáng)度。左圖:血清和***存在的條件下能提高LipoD293試劑(升級(jí)版)對(duì)在HepG2細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率。通過三種不同的條件下轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞(生長在膠原處理的培養(yǎng)皿上)---無血清和***,10%血清和***的存在,轉(zhuǎn)染5小時(shí)后換液和不換液。上海陽離子聚合物轉(zhuǎn)染試劑推薦

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