抗體的使用者可以參考相當(dāng)***的免疫學(xué)知識,但是許多使用者不知道免疫原設(shè)計相當(dāng)復(fù)雜,使用免疫原性較低但特異性更強的多肽,對產(chǎn)生高質(zhì)量抗體很關(guān)鍵。 基于Chemicon?、Upstate?、Millipore?、Calbiochem?和Novagen?等子品牌的強強聯(lián)合,默克密理博在創(chuàng)新的免疫原設(shè)計、免疫、挑選、篩選和驗證等方面有著數(shù)十年的經(jīng)驗,創(chuàng)造出許多被***使用的抗體,如4G10,Neun,組蛋白修飾等抗體都是相關(guān)領(lǐng)域的“金標(biāo)”抗體。 在抗體投入生產(chǎn)并銷售之后,我們與相關(guān)領(lǐng)域**緊密協(xié)作,希望能夠更加完善免疫原設(shè)計和抗體性能。我們的β測試團隊正在不斷擴大,持續(xù)進(jìn)行著驗證工作。我們的所有抗...
IHC 是從根詞immuno"(與在操作中所用的抗體有關(guān))和"histo"(意思是"組織")而得其名稱。與之不同,免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC)的根詞是"cyto"(意思是"細(xì)胞"),是以培養(yǎng)或分離的細(xì)胞代替組織進(jìn)行的。IHC和ICC廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)研究,目的是了解生物標(biāo)記物的分布和定位以及在生物組織或細(xì)胞中差異表達(dá)的蛋白。 在IHC/ICC中的主要步驟如下∶·樣本制備·抗原修復(fù)· 抗體染色·抗體檢測 成功的IHC實驗取決于高質(zhì)量抗體選擇和合遇的實驗濃度。每一種抗體都要根據(jù)實際的實驗情況進(jìn)行優(yōu)化。即使是同一反應(yīng)體系,針對不同的抗體適合的稀釋濃度也是不同的。實驗者可以以說明書上推薦的稀釋倍數(shù)作為參考。...
不均勻樣品,如混濁液、樣品中有顆粒節(jié) 樣品和標(biāo)準(zhǔn)品混勻不亮分移液器加樣不準(zhǔn) 移液器在樣品和/或標(biāo)準(zhǔn)品使用時存在題留 在解育過程中試劑混合不充分洗滌不充分 液體蒸發(fā) 稀釋倍數(shù)的計算不正確修改實驗程序樣品處理不正確 處理辦法: 確保只使用特定批次的試劑進(jìn)行實驗。 檢查所用的實驗稀釋度(按國說明書推薦的稀釋度進(jìn)行實驗)檢查橫孔板分光光度i計中的渡長。 檢查在產(chǎn)品說明書中該批次的闡育時間。(酶底物的解育時間用于20-28℃范圍內(nèi))上海益啟生物的抗體詢價聯(lián)系方式。楊浦區(qū)組蛋白抗體抗體商家用途極為***的液相懸浮芯片法,是基于Luminex公司開發(fā)的xMAP?技術(shù)。 多因子檢測技術(shù)...
酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA) 是結(jié)合了抗體的特異性和簡單髓分析法的高靈敏度蛋白檢測方法。通過采用抗體-抗原反應(yīng),ELISA可以提供抗原或抗體濃度測量。有兩種常用的ELISA形式∶雙抗夫心EUSA和競爭性ELISA。圖解和描述如下B。?實驗中**常用的是雙抗夾心ELUSA,它用于測定未知樣品中的抗原濃度,是**有用的免疫分析法之一。夾心ELISA 快速且準(zhǔn)確;并且如果提供純化的抗原標(biāo)準(zhǔn)品,該分析法可用于生成劑量-反應(yīng)曲線,用于測定未知樣品中抗源的***量。上海標(biāo)簽抗體哪家靠譜?虹口區(qū)H3抗體抗體聯(lián)系電話非特異性條帶 抗體(一抗或二抗)濃度過高 降低抗體濃...
前言 流式細(xì)脆術(shù)是具有很強統(tǒng)計學(xué)功能的技接術(shù),它根據(jù)物理特征和焚光信號對懸浮細(xì)胞群進(jìn)行鑒定和分選。在50年前就已經(jīng)開發(fā)了流式細(xì)胞分析儀;直至1960年代晚期,這種技術(shù)才開始商業(yè)化。 流式細(xì)胞術(shù)定義為在懸浮液中,當(dāng)粒子(如細(xì)胞)通過激光或其它光源時,測量細(xì)胞和熒光特性。 根據(jù)這些檢測,可以對它們之中的特定群體和亞群進(jìn)行鑒定,甚至可以通過細(xì)胞分選進(jìn)行物理分離;在細(xì)胞分選中,根據(jù)熒光特征使細(xì)胞帶電從而發(fā)生靜電偏移。也可以分析粘附細(xì)胞和因體組織,前提是要對它們進(jìn)行解離,建立單細(xì)胞懸浮液。 流式細(xì)胞術(shù)依賴于懸浮細(xì)胞的流體動力學(xué),建立在激光器前通過的單細(xì)脆流。通過細(xì)胞散射光方式的不同,在千粒子/秒...
IHC 是從根詞immuno"(與在操作中所用的抗體有關(guān))和"histo"(意思是"組織")而得其名稱。與之不同,免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC)的根詞是"cyto"(意思是"細(xì)胞"),是以培養(yǎng)或分離的細(xì)胞代替組織進(jìn)行的。IHC和ICC廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)研究,目的是了解生物標(biāo)記物的分布和定位以及在生物組織或細(xì)胞中差異表達(dá)的蛋白。 在IHC/ICC中的主要步驟如下∶·樣本制備·抗原修復(fù)· 抗體染色·抗體檢測 成功的IHC實驗取決于高質(zhì)量抗體選擇和合遇的實驗濃度。每一種抗體都要根據(jù)實際的實驗情況進(jìn)行優(yōu)化。即使是同一反應(yīng)體系,針對不同的抗體適合的稀釋濃度也是不同的。實驗者可以以說明書上推薦的稀釋倍數(shù)作為參考。...
ChIlP檢測用磁力架 我們擁有多種用于Magna ChIP檢測的磁力架供您選擇∶常規(guī)Magna GrlP磁力架,,加強型PureProteome磁力架和高通量ChIP的理想之選——***推出的Magna GrlPHT96磁力架。PureProteome 磁力架 微珠捕獲效率高∶比較高比較強度的梯形磁體可捕獲?多達(dá)300微升磁珠 ***效率高∶可移動磁體和獨特的渦旋內(nèi)表?面設(shè)計使微珠混合更加充分 操作性強∶符合人體工程學(xué)設(shè)計的磁力架可安全插放1.5mL和2mL反應(yīng)管 Protein A/G beads 背景更低,富集倍數(shù)更高 Troubleshooting 問題 可能...
售前售后保障和支持 好的售前售后保障和支持可以幫助你快速解決實驗中遇到的問題,保證實驗進(jìn)度。 供應(yīng)商是否提供售前售后保障? 抗體投訴的處理是否快速?以免影響整個實驗的進(jìn)程。 默克密理博抗體**安心保障計劃,抗體不滿意就賠付,更有強大的技術(shù)支持團隊助你優(yōu)化實驗。 抗體的保存指南 正確進(jìn)行抗體的保存對其功能和使用期限極為重要 正確保存的抗體可在較長時間內(nèi)不發(fā)生降解,有效性可延長至幾個月甚至幾年。 相反,未正確保存的抗體可在幾個小時內(nèi)變性,導(dǎo)致實驗失敗。上海買Sigma抗體哪家靠譜?青浦區(qū)抗體代理商多克隆抗體通過快速蛋白液相色譜(FPLC)系統(tǒng)純化,每個色譜柱不得使用超過10次。采用...
信號弱 信號高 本底較高 準(zhǔn)確度較低(一偶然誤差) 計算的教據(jù)過高或過任《一系統(tǒng)誤差,數(shù)據(jù)與"標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)"的偏差) 可能的原因: 實驗試劑使用錯誤實驗試劑損壞 所用實驗試劑稀釋度錯誤儀器的過濾器選擇錯誤(波長)前育時間過短,溫度過低 試劑溫度不正確 在較高濃度時,疊氮化鈉、燕基乙身或DTT可能干擾過氧化物恃活性。所用實驗試劑稀釋度錯誤醇育時間過長,溫度過高 洗洛不足洗得污染 試劑或小瓶/試管受到以前實驗的污染 所用實驗試劑(抗體和等結(jié)合物)稀釋度錯誤上海益啟生物的抗體詢價聯(lián)系方式。楊浦區(qū)MYC抗體抗體代理商非特異性條帶 抗體(一抗或二抗)濃度過高 ...
經(jīng)ChIP驗證的抗體洗滌、洗脫和交聯(lián)逆轉(zhuǎn) DNA純化 PCR分析 Magna ChIP? HiSens Kits Magna ChIP? HiSens kit采用統(tǒng)一的緩沖液體系,兼容更***的樣本起始量,獲得更好的信噪 比,以實現(xiàn)超靈敏檢測。 產(chǎn)品優(yōu)勢: 兼容更廣的起始樣本量,檢測樣本量低至10000個細(xì)胞 (10,000 到1,000,000 個細(xì)胞)無論是細(xì)胞或組織樣本,都可以獲得很好的結(jié)果試劑盒提供Protein A/G磁珠,比Protein A 或G 磁珠兼容更***的抗體亞型統(tǒng)一的緩沖液體系用于超聲,ChIP和清洗,可獲得更低的背景和更高的富集倍數(shù)特殊的洗脫緩沖液簡化...
不均勻樣品,如混濁液、樣品中有顆粒節(jié) 樣品和標(biāo)準(zhǔn)品混勻不亮分移液器加樣不準(zhǔn) 移液器在樣品和/或標(biāo)準(zhǔn)品使用時存在題留 在解育過程中試劑混合不充分洗滌不充分 液體蒸發(fā) 稀釋倍數(shù)的計算不正確修改實驗程序樣品處理不正確 處理辦法: 確保只使用特定批次的試劑進(jìn)行實驗。 檢查所用的實驗稀釋度(按國說明書推薦的稀釋度進(jìn)行實驗)檢查橫孔板分光光度i計中的渡長。 檢查在產(chǎn)品說明書中該批次的闡育時間。(酶底物的解育時間用于20-28℃范圍內(nèi))找Abcam抗體哪家靠譜?黃浦區(qū)Abcam抗體抗體聯(lián)系方式非特異性條帶 抗體(一抗或二抗)濃度過高 降低抗體濃度...
如果吸光度任于1.0,則延長底物的解育時間使用之前應(yīng)確保所用的試劑已回復(fù)至室溫(20-28C)。使用不含或含有較任濃度(
對于單克隆抗體,我們采用的是機器人克隆和篩選系統(tǒng),該系統(tǒng)可以處理所有雜交瘤的融合和培養(yǎng)。這種高度自動化的流程使用了前列技術(shù),確保達(dá)到比較大產(chǎn)量和比較好的一致性。我們通過陣列射流自動化微陣列系統(tǒng)檢測融合情況,鑒別陽性克隆,然后用ELISA和Western blot進(jìn)行再篩查。***,對陽性克隆多次稀釋,以分離出比較高質(zhì)量的產(chǎn)物,直至樣本達(dá)到**克隆性。這一附加的程序正是默克密理博抗體質(zhì)量優(yōu)于競爭對手的原因之一。 多克隆抗體的研發(fā)上海益啟訂購抗體的服務(wù)電話是多少?神經(jīng)抗體抗體報價售前售后保障和支持 好的售前售后保障和支持可以幫助你快速解決實驗中遇到的問題,保證實驗進(jìn)度。 供應(yīng)商是否提供售前售...
臨床中的流式細(xì)胞術(shù) 如果沒有流式細(xì)胞分析儀,任何設(shè)備精良的現(xiàn)代臨床實驗室都不是完關(guān)的;流式細(xì)胞分析儀已成為醫(yī)學(xué)篩查和診斷的基礎(chǔ)工具。無論何時內(nèi)科醫(yī)生要進(jìn)行全血細(xì)胞計數(shù)(CBC),臨床實驗室科學(xué)家均具有進(jìn)行外周血樣本流式細(xì)胞分析的資質(zhì);歷史上,全血細(xì)脆計數(shù)是要進(jìn)行血涂片顯微銀檢查的一種實驗,該分析在統(tǒng)計學(xué)上受限于病理學(xué)家可進(jìn)行檢查的視野數(shù)。針對CBC檢查,對白細(xì)胞的差示光散射性質(zhì)進(jìn)行了開發(fā),以便快速可靠地測量外周血細(xì)胞類型的相對豐度。前向角和側(cè)向散射甚至可能有助于檢測由 于各種疾?。ㄈ缲氀凸撬柙錾惓>C合征)引起的尺寸和形狀異常。在臨床診斷和***進(jìn)展評估中加入已知疾病標(biāo)記物的抗體試驗提高...
信號弱 信號高 本底較高 準(zhǔn)確度較低(一偶然誤差) 計算的教據(jù)過高或過任《一系統(tǒng)誤差,數(shù)據(jù)與"標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)"的偏差) 可能的原因: 實驗試劑使用錯誤實驗試劑損壞 所用實驗試劑稀釋度錯誤儀器的過濾器選擇錯誤(波長)前育時間過短,溫度過低 試劑溫度不正確 在較高濃度時,疊氮化鈉、燕基乙身或DTT可能干擾過氧化物恃活性。所用實驗試劑稀釋度錯誤醇育時間過長,溫度過高 洗洛不足洗得污染 試劑或小瓶/試管受到以前實驗的污染 所用實驗試劑(抗體和等結(jié)合物)稀釋度錯誤上海益啟生物的聯(lián)系電話。崇明區(qū)神經(jīng)抗體抗體咨詢報價免疫沉淀(又叫免疫沉淀(IP)) 免疫沉淀是很有價值的研究工具,目的是研究...
售前售后保障和支持 好的售前售后保障和支持可以幫助你快速解決實驗中遇到的問題,保證實驗進(jìn)度。 供應(yīng)商是否提供售前售后保障? 抗體投訴的處理是否快速?以免影響整個實驗的進(jìn)程。 默克密理博抗體**安心保障計劃,抗體不滿意就賠付,更有強大的技術(shù)支持團隊助你優(yōu)化實驗。 抗體的保存指南 正確進(jìn)行抗體的保存對其功能和使用期限極為重要 正確保存的抗體可在較長時間內(nèi)不發(fā)生降解,有效性可延長至幾個月甚至幾年。 相反,未正確保存的抗體可在幾個小時內(nèi)變性,導(dǎo)致實驗失敗。益啟生物是Sigma抗體的代理商。靜安區(qū)H3抗體抗體聯(lián)系方式如果實驗試劑將用于進(jìn)一步測量,應(yīng)避免直接使用移液管從試劑瓶中移取。(氧化...
Troubleshooting 問題 微珠計數(shù)不足 本底過高 微珠不在制定的區(qū)域內(nèi)或圈門中 整個微孔板的信號與本底相同 陽性對照的信號任樣品信號過高或飽和 樣品信號過低 樣品和/或標(biāo)準(zhǔn)品CV值較大 微孔板洗板機吸液高度設(shè)置過低微珠混合物配制不當(dāng) 樣品顆粒物或粘度引起干擾 沒有正確調(diào)整探針高度 本底孔受污染 洗滌不充分 Luminex只器沒有正確校準(zhǔn)或近期沒有校準(zhǔn) 沒有正確詞整門設(shè)置 微珠區(qū)域設(shè)置錯誤所用樣品類型不正確只器沒有洗滌或primed 做珠暴露于光下檢測不正確或檢測不到未加入抗體鑒定抗體的報價具體是多少呢?青浦區(qū)Upstate抗體抗體參數(shù)除非您正在研究...
免疫沉淀(又叫免疫沉淀(IP)) 免疫沉淀是很有價值的研究工具,目的是研究某一特定蛋白的關(guān)鍵信息,包括:小規(guī)模蛋白純化用于功能研究,N-端序列分析,蛋白-蛋白相互作用的研究,細(xì)胞或組織中蛋白相對豐度和分布的測定。免疫沉淀分析法的成功取決于兩個主要因素:原始樣品中抗原的豐度和抗體對該抗原的親和力(一般需要108 M-1或以上的親和力)。在開始免疫沉淀之前,確保特定的步驟有適當(dāng)?shù)膶嶒瀸φ?。對照抗體在性質(zhì)上盡可能與該特異性抗體類似。上海標(biāo)簽抗體哪家靠譜?金山區(qū)H3抗體抗體銷售經(jīng)ChIP驗證的抗體洗滌、洗脫和交聯(lián)逆轉(zhuǎn) DNA純化 PCR分析 Magna ChIP? HiSens Kits M...
在本節(jié)中,將討論目前仍在應(yīng)用中的主要免疫技術(shù)理論和實驗。 免疫學(xué)研究時間軸 1900.Ehrlich提出抗體形成理論 1938.Marrack提出抗原-抗體結(jié)合假說 1962.Edelman & Porter解析抗體分子結(jié)構(gòu) 1975.Kohler & Milstein開發(fā)單克隆抗體產(chǎn)品 1986.采用基因工程生產(chǎn)乙肝疫苗 1900.Landsteiner & Levine使用天然抗血清識別ABO血型 1900.Nuttall, Wasserman &Schutze 采用沉淀素試驗區(qū)分人乳、牛乳和山羊乳 1900-01.Uhlenhuth 關(guān)于雞蛋蛋白分型的工作,在醫(yī)學(xué)工作中...
科研者實驗和協(xié)作 在抗體投入生產(chǎn)并銷售之后,我們與相關(guān)領(lǐng)域**緊密協(xié)作,希望能夠更加完善免疫原設(shè)計和抗體性能。我們的β測試團隊正在不斷擴大,持續(xù)進(jìn)行著驗證工作。我們的所有抗體都是**質(zhì)量保證。默克密理博抗體是目前市場上應(yīng)用*****、**受信賴、經(jīng)高度驗證的抗體之一。從開始研發(fā)直至進(jìn)行生產(chǎn)和分銷,我們的抗體始終保持著高質(zhì)量,保證科研者的實驗成功率。 默克密理博抗體都經(jīng)過嚴(yán)格實驗驗證,享有極高的客戶使用滿意度,投訴率行業(yè)更低
例如,磷酸特異性抗體可能只與活化的磷酸化蛋白發(fā)生反應(yīng)。如果您的蛋白定位在胞內(nèi),則必須對細(xì)胞進(jìn)行裂解。流式細(xì)胞實驗可能要選擇識別細(xì)胞表面分子的抗體。如果您的蛋白有三級結(jié)構(gòu),且掩蓋了抗原表位,則必須對樣本進(jìn)行變性,因為有些抗體無法識別自然狀態(tài)的蛋白。一些抗體只在冷凍或非固定組織中起效,而有些抗體只對經(jīng)抗原修復(fù)后的石蠟切片起效。 目標(biāo)蛋白的物種來源 比較好選擇明確標(biāo)有目標(biāo)蛋白種屬的抗體。參考抗體說明書或網(wǎng)站信息。Upstate抗體哪家靠譜?寶山區(qū)H3抗體抗體報價1953.Grabar & Williams發(fā)表免疫電泳的關(guān)鍵論文 1953.Grabar & Williams發(fā)表免疫電泳的關(guān)鍵論文...
· 間接檢測法 在間接檢測法中,用純化抗體進(jìn)行解育和目標(biāo)抗原結(jié)合,隨后采用熒光標(biāo)記二抗,形成一抗-焚光二抗復(fù)合物,從而實現(xiàn)對目標(biāo)抗原的檢測?!ど锼鼗瘷z測法 第三種方法即生物素化檢測法;親和素是細(xì)菌源蛋白,由于它們與生物素的天然親和力,故如此命名。生物素-鎮(zhèn)需親和素復(fù)合物有時叫做molecular velcro",因其作為一種結(jié)合兩種分子的研究工具已***用于免疫檢測、蛋白組學(xué)、親和純化以及核酸-蛋白相互作用的分析中。市場上有多種生物素化一抗或二抗可供選擇;通過隨后對熒光基團結(jié)合鏈霉親和素的解育進(jìn)行流式細(xì)胞檢測??赡軙崿F(xiàn)信號放大,因為生物素具有四個鏈霉親和素結(jié)合位點,導(dǎo)致熒光信號可能增加...
對于探索性研究,Western blotting仍是優(yōu)先平臺,是用于評估新抗體和其它蛋白檢測分析 法(如ELISA、基于微珠的分析法、流式細(xì)胞術(shù)和免疫組織化學(xué))的標(biāo)準(zhǔn)。新技術(shù)的開發(fā)**減少Western blotting過程需要的時間(例如默克密理博的 SNAP i.d.? 2.0系統(tǒng),目錄編 號SNAP2MM),提高了WB實驗的效率。 Western blotting的基本程序涉及下述關(guān)鍵步驟 樣本制備 凝膠電泳 轉(zhuǎn)膜 封閉非特異性結(jié)合 加入抗體 檢測 Western Blot 實驗流程圖 Troubleshooting 問題 ...
· 間接檢測法 在間接檢測法中,用純化抗體進(jìn)行解育和目標(biāo)抗原結(jié)合,隨后采用熒光標(biāo)記二抗,形成一抗-焚光二抗復(fù)合物,從而實現(xiàn)對目標(biāo)抗原的檢測。·生物素化檢測法 第三種方法即生物素化檢測法;親和素是細(xì)菌源蛋白,由于它們與生物素的天然親和力,故如此命名。生物素-鎮(zhèn)需親和素復(fù)合物有時叫做molecular velcro",因其作為一種結(jié)合兩種分子的研究工具已***用于免疫檢測、蛋白組學(xué)、親和純化以及核酸-蛋白相互作用的分析中。市場上有多種生物素化一抗或二抗可供選擇;通過隨后對熒光基團結(jié)合鏈霉親和素的解育進(jìn)行流式細(xì)胞檢測??赡軙崿F(xiàn)信號放大,因為生物素具有四個鏈霉親和素結(jié)合位點,導(dǎo)致熒光信號可能增加...
對于探索性研究,Western blotting仍是優(yōu)先平臺,是用于評估新抗體和其它蛋白檢測分析 法(如ELISA、基于微珠的分析法、流式細(xì)胞術(shù)和免疫組織化學(xué))的標(biāo)準(zhǔn)。新技術(shù)的開發(fā)**減少Western blotting過程需要的時間(例如默克密理博的 SNAP i.d.? 2.0系統(tǒng),目錄編 號SNAP2MM),提高了WB實驗的效率。 Western blotting的基本程序涉及下述關(guān)鍵步驟 樣本制備 凝膠電泳 轉(zhuǎn)膜 封閉非特異性結(jié)合 加入抗體 檢測 Western Blot 實驗流程圖 Troubleshooting 問題 ...
如果實驗試劑將用于進(jìn)一步測量,應(yīng)避免直接使用移液管從試劑瓶中移取。(氧化活性污采物可通過非特異性顯色影響費底物),檢查所用抗體和陶結(jié)合物的實驗驗稀釋度 檢查確保樣品根據(jù)建議的樣品操作抽提、配制和貯菱(聚丙烯試管,澄清樣品的貯載溫度為-20℃)。配置樣品和標(biāo)準(zhǔn) 品時究分程勻檢查您的移液器,必要時進(jìn)行校準(zhǔn)。在每次移液器移取后更換移液器吸頭。加樣后,充分震蕩微孔板,使試劑混勻 檢查自動微孔板洗板機能正常工作;在每個洗滌步驟后,必須完全除去殘留液體。采購科研抗體去哪家比較專業(yè)?標(biāo)簽抗體抗體銷售對于探索性研究,Western blotting仍是優(yōu)先平臺,是用于評估新抗體和其它蛋白檢測分析 法(如...
無信號 在檢測之前,轉(zhuǎn)印膜在貯藏過程中發(fā) 生蛋白降解 二抗選擇錯誤 曝光時間太短 抗原上樣量不足 抗原可能被破壞 檢測系統(tǒng) 一抗的親和力較低 化學(xué)發(fā)光底物已喪失活性。 已從膜上剝離抗體并再次雜交。 處理方法 使用新轉(zhuǎn)的膜進(jìn)行實驗。 檢查是否使用適當(dāng)?shù)亩埂? 增加曝光時間。 在凝膠上載入更多的抗原,或在載入之前使用超濾管濃縮樣品, 或使用免疫沉淀,以增加凝膠中的目標(biāo)蛋白量。 檢查確保電泳處理未破壞抗原性。 增加(和優(yōu)化)一抗的濃度和培養(yǎng)時間、溫度。Merck抗體的...
通過改變參數(shù)(見第5.3節(jié))和評估他們對梁色質(zhì)回收率的影響來優(yōu)化這些步驟。使用機械力,如杜恩斯勻漿器或坡璃珠改善細(xì)脆溶輝。優(yōu)化裂解步要和避免起泡。?在甲醛中培養(yǎng)時間過長可能掩蓋經(jīng)ChIP抗體識別所需要的表位。如果您使用的是單克隆抗體,此問題可能更加嚴(yán)重。過度交聯(lián)也可能導(dǎo)致超聲處理時復(fù)合物難以形成。優(yōu)化交聯(lián)步驟∶甲醛的**終液度應(yīng)為1%;您應(yīng)確定***的交聯(lián)時間,然后再繼績進(jìn)行實驗。在研究方案的后續(xù)步驟中,交聯(lián)不足可能引起靶蛋白從DNA解離。上海H3抗體哪家靠譜?普陀區(qū)WB抗體抗體商家例如,磷酸特異性抗體可能只與活化的磷酸化蛋白發(fā)生反應(yīng)。如果您的蛋白定位在胞內(nèi),則必須對細(xì)胞進(jìn)行裂解。流式細(xì)胞實驗...
無信號 在檢測之前,轉(zhuǎn)印膜在貯藏過程中發(fā) 生蛋白降解 二抗選擇錯誤 曝光時間太短 抗原上樣量不足 抗原可能被破壞 檢測系統(tǒng) 一抗的親和力較低 化學(xué)發(fā)光底物已喪失活性。 已從膜上剝離抗體并再次雜交。 處理方法 使用新轉(zhuǎn)的膜進(jìn)行實驗。 檢查是否使用適當(dāng)?shù)亩埂? 增加曝光時間。 在凝膠上載入更多的抗原,或在載入之前使用超濾管濃縮樣品, 或使用免疫沉淀,以增加凝膠中的目標(biāo)蛋白量。 檢查確保電泳處理未破壞抗原性。 增加(和優(yōu)化)一抗的濃度和培養(yǎng)時間、溫度。標(biāo)簽抗體的報價具...
非特異性條帶 抗體(一抗或二抗)濃度過高 降低抗體濃度。 SDS可能引起對固定蛋白條帶的非特 轉(zhuǎn)膜后,振蕩洗滌 異性結(jié)合 在操作過程中不使用SDS。 條帶擴散 抗體(一抗或二抗)濃度過高 降低抗體濃度。 在凝膠上載入過多蛋白 減少蛋白上樣量。 黑色印跡,白色條帶, 抗體(一抗或二抗)濃度過高 減少抗體濃度,特別是HRP偶聯(lián)的二抗。 或信號快...