斑馬魚(yú)作為繼大小鼠后的第三模式生物，其與人類基因同源性高達(dá)87%，皮膚結(jié)構(gòu)與人類高度相似，且胚胎透明、發(fā)育周期短，成為化妝品功效評(píng)價(jià)的理想模型。根據(jù)《化妝品監(jiān)督管理?xiàng)l例》及國(guó)際3R原則，出生5天內(nèi)的斑馬魚(yú)胚胎不屬于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)范疇，可替代哺乳動(dòng)物測(cè)試，明顯降低倫理爭(zhēng)議和實(shí)驗(yàn)成本。斑馬魚(yú)檢測(cè)具備高通量、可視化、高效率三大優(yōu)勢(shì)：?jiǎn)未螌?shí)驗(yàn)可處理數(shù)百條胚胎，結(jié)果通過(guò)顯微鏡或熒光標(biāo)記實(shí)時(shí)觀測(cè)；實(shí)驗(yàn)周期只需3-7天，相比人體臨床測(cè)試縮短90%以上時(shí)間；成本只為傳統(tǒng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的1/10，尤其適用于原料篩選、配方優(yōu)化等早期研發(fā)階段?；瘖y品實(shí)驗(yàn)常用的斑馬魚(yú)品系有AB、TL和Tübingen等?；瘖y品原料體內(nèi)功效評(píng)價(jià)

盡管用于化妝品評(píng)價(jià)的創(chuàng)新模型和技術(shù)在不斷發(fā)展，但無(wú)論是斑馬魚(yú)模型、體外細(xì)胞模型還是皮膚器官芯片等均不能完全模擬體內(nèi)皮膚的真實(shí)結(jié)構(gòu)與功能，這使得離體皮膚評(píng)價(jià)模型逐漸進(jìn)入人們的視野。離體皮膚也被稱為皮膚外植體，它是由人體來(lái)源的皮膚組織經(jīng)體外培養(yǎng)而獲得的模型[26]。離體皮膚通過(guò)適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)方式，可在體外維持一定的組織活力，目前，已被廣泛應(yīng)用于化妝品功效測(cè)評(píng)、傷口愈合、皮膚相關(guān)疾病的研究中。離體皮膚是接近健康和患病皮膚生理機(jī)能的模型，包含完整的皮膚細(xì)胞類群如角質(zhì)形成細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、黑素細(xì)胞、朗格漢斯細(xì)胞;含有膠原蛋白、彈性蛋白、糖胺聚糖等細(xì)胞外基質(zhì);包含皮膚附屬物如汗腺等叨。本文將在下面章節(jié)重點(diǎn)概述離體皮膚模型及其在化妝品功效評(píng)價(jià)中的應(yīng)用?；瘖y品皮膚外植體試驗(yàn)機(jī)構(gòu)人們渴望擁有明亮、均勻的肌膚，美白化妝品一直以來(lái)都備受關(guān)注。

環(huán)特化妝品CRO服務(wù)站結(jié)合拉曼光譜技術(shù)，從定性和定量的角度研究化妝品中活性成分在皮膚中的滲透特性，包括滲透深度及滲透量，為活性成分的作用機(jī)理研究提供一定技術(shù)支持。這不僅是拉曼技術(shù)在化妝品透皮吸收研究領(lǐng)域的創(chuàng)新應(yīng)用，更為活性成分在皮膚中的吸收動(dòng)力學(xué)研究及配方優(yōu)化提供新的研究思路。經(jīng)過(guò)幾十年的發(fā)展，拉曼光譜技術(shù)已經(jīng)取得了巨大的進(jìn)步，在不同領(lǐng)域中得到了廣泛的應(yīng)用。拉曼光譜在皮膚研究中有諸多應(yīng)用，包括皮膚成分分析，透皮吸收監(jiān)測(cè)和分析，皮膚病學(xué)中的診斷功能。利用拉曼光譜技術(shù)研究活性成分在皮膚中的滲透濃度分布，可以為產(chǎn)品優(yōu)化、功效評(píng)價(jià)等提供重要的數(shù)據(jù)支撐。未來(lái)，拉曼數(shù)據(jù)分析還可以結(jié)合人工智能實(shí)現(xiàn)更多跨場(chǎng)景應(yīng)用，在臨床及制藥相關(guān)領(lǐng)域，無(wú)損分析與監(jiān)測(cè)技術(shù)將會(huì)越來(lái)越受青睞。

研究人員發(fā)現(xiàn)，離體培養(yǎng)48小時(shí)的全層皮膚可保持屏障特性，且能對(duì)不同強(qiáng)度的屏障破壞做出反應(yīng)，使用膠帶剝離或4小時(shí)十二烷基硫酸鈉(SLS)處理通過(guò)破壞皮膚結(jié)構(gòu)、促進(jìn)炎癥因子IL-6、IL-8的表達(dá)破壞皮膚屏障5]。使用1:1(v:v)乙mi:bing酮混合物對(duì)離體皮膚進(jìn)行損傷造模，PPAR-α激動(dòng)劑RFV3可通過(guò)增加神經(jīng)酰胺、絲聚蛋白和轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶1的表達(dá)來(lái)促進(jìn)離體皮膚的屏障修護(hù)過(guò)程[”。離體皮膚模型還被用來(lái)評(píng)估清潔產(chǎn)品的功效，ZHOU等人通過(guò)對(duì)沐浴露A和沐浴露B處理的離體皮膚進(jìn)行免疫熒光染色發(fā)現(xiàn)，與水對(duì)照和沐浴露A處理相比，經(jīng)沐浴露B處理的離體皮膚在處理7天后，顆粒層和角質(zhì)層中絲聚蛋白的表達(dá)明顯減少，證明沐浴露B對(duì)皮膚屏障具有破壞作用，此外，使用MTT檢測(cè)離體皮膚的組織活力也是用來(lái)評(píng)價(jià)皮膚屏障修護(hù)功效的重要指標(biāo)。通過(guò)長(zhǎng)期的觀察和評(píng)估，可以了解化妝品的功效是否持久。

測(cè)試結(jié)果的科學(xué)解讀是化妝品人體淡斑美白功效測(cè)試的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。環(huán)特人體功效實(shí)驗(yàn)室通過(guò)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)臄?shù)據(jù)分析，將測(cè)試數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)化為直觀且具有說(shuō)服力的結(jié)論。通過(guò)對(duì)比試驗(yàn)側(cè)與陰性對(duì)照側(cè)的皮膚黑色素含量、ITA 值及膚色視覺(jué)評(píng)分差值，以統(tǒng)計(jì)學(xué)方法（P＜0.001）驗(yàn)證產(chǎn)品的明顯性差異。例如，若在 D28 回訪時(shí)，試驗(yàn)側(cè)皮膚黑色素含量較陰性對(duì)照明顯下降，且 ITA 值明顯上升，則可科學(xué)判定產(chǎn)品具有淡斑美白、提亮的功效。這種基于數(shù)據(jù)的結(jié)論不僅為企業(yè)提供產(chǎn)品優(yōu)化方向，也為消費(fèi)者選購(gòu)提供了可信賴的參考依據(jù)，推動(dòng)美白化妝品市場(chǎng)朝著更理性、科學(xué)的方向發(fā)展。斑馬魚(yú)是一種小型、易于繁殖的淡水魚(yú)類，其生命周期短且繁殖能力強(qiáng)，能夠在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行大規(guī)模的實(shí)驗(yàn)。化妝品功效離體皮膚檢測(cè)機(jī)構(gòu)

隨著科技的不斷進(jìn)步，人體功效測(cè)試的方法和技術(shù)也在不斷創(chuàng)新?；瘖y品原料體內(nèi)功效評(píng)價(jià)

皮膚外用產(chǎn)品的制造、運(yùn)輸和銷售需要事先進(jìn)行安全性評(píng)估，并評(píng)估可能因預(yù)期用途、誤用、或意外皮膚暴露而導(dǎo)致的皮膚反應(yīng)。離體皮膚的另一重要應(yīng)用是評(píng)估皮膚外用產(chǎn)品的安全性和功效性，這包括日用品、化妝品、藥品、醫(yī)療器械等。BURGHER等人使用腹部整形手術(shù)獲取的人體皮膚外植體研究了氫氟酸的腐蝕性，他們發(fā)現(xiàn)70%的氯氟酸在作用的5分鐘內(nèi)即可完全穿透皮膚，這與之前研究的意外氫氟酸暴露的臨床結(jié)果是一致的均。研究人員在OECDTG439標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)之上，開(kāi)發(fā)了使用離體皮膚模型評(píng)估化合物是否具有潛在刺激性的方法。通過(guò)對(duì)120種化妝品刺激離體皮膚的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與人體斑貼實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)離體皮膚模型檢測(cè)的特異性為89.9%，準(zhǔn)確率為89.1%[46]。此外，科研人員還使用彗星實(shí)驗(yàn)對(duì)手術(shù)獲得的離體皮膚進(jìn)行了化合物遺傳毒性的評(píng)估，通過(guò)將離體皮膚局部暴露于20中化學(xué)物質(zhì)中，他們發(fā)現(xiàn)其遺傳毒性檢測(cè)的靈敏度、特異性和準(zhǔn)確性分別為89%、90%和89%切。這些結(jié)果均表明離體皮膚是外用產(chǎn)品刺激性、腐蝕性、遺傳毒性等評(píng)價(jià)的可靠模型，具有廣泛的應(yīng)用前景?；瘖y品原料體內(nèi)功效評(píng)價(jià)