在進(jìn)行原代肝細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),選擇合適的培養(yǎng)條件非常重要,以下是一些選擇培養(yǎng)條件的建議:1.培養(yǎng)基:選擇適合肝細(xì)胞生長(zhǎng)的培養(yǎng)基,如William'sE培養(yǎng)基、RPMI1640培養(yǎng)基等。不同的培養(yǎng)基成分可能會(huì)影響肝細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能。2.溫度和濕度:肝細(xì)胞的培養(yǎng)溫度通常為37°C,濕度為95%左右。在培養(yǎng)過(guò)程中,需要保持培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度和濕度穩(wěn)定。3.氧氣含量:肝細(xì)胞需要充足的氧氣供應(yīng),因此需要選擇透氣性好的培養(yǎng)容器,并保持培養(yǎng)箱內(nèi)的氧氣含量充足。4.細(xì)胞密度:肝細(xì)胞的培養(yǎng)密度需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮团囵B(yǎng)條件來(lái)確定。一般來(lái)說(shuō),肝細(xì)胞的培養(yǎng)密度不宜過(guò)高,以免影響細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能。5.細(xì)胞因子:在培養(yǎng)過(guò)程中,可以添加一些細(xì)胞因子,如胰島素、表皮生長(zhǎng)因子等,以促進(jìn)肝細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能。6.培養(yǎng)時(shí)間:肝細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí)間需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮团囵B(yǎng)條件來(lái)確定。一般來(lái)說(shuō),肝細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),以免影響細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能??傊?,選擇合適的培養(yǎng)條件需要考慮多方面的因素,包括培養(yǎng)基、溫度、濕度、氧氣含量、細(xì)胞密度、細(xì)胞因子和培養(yǎng)時(shí)間等。在選擇培養(yǎng)條件時(shí),需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮团囵B(yǎng)條件來(lái)確定,以確保肝細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能。 原代肝細(xì)胞衍生的Organoid既能提供需要的擁肝毒模型,也能體現(xiàn)肝細(xì)胞在應(yīng)對(duì)病原體時(shí)的生理反應(yīng)。北京牛原代肝細(xì)胞圖片
原代肝細(xì)胞也可以用于Organ-on-a-chip的構(gòu)建。Organ-on-a-chip是一項(xiàng)創(chuàng)新性的科技成果,它在載玻片大小的芯片上構(gòu)建了一個(gè)完整的生理組織微系統(tǒng),其中包含有原代肝細(xì)胞、肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞、生物流體和機(jī)械力所需微環(huán)境的關(guān)鍵要素。這個(gè)微型肝臟模型可以在體外模擬人體肝臟的主要結(jié)構(gòu)功能特征和復(fù)雜的組織間聯(lián)系,為藥物藥效評(píng)價(jià)、藥物安全性評(píng)價(jià)、化妝品安全性評(píng)價(jià)、食品安全性評(píng)價(jià)、環(huán)境保護(hù)評(píng)價(jià)等提供了一種全新的方法和手段。 這個(gè)微型肝臟模型的研發(fā),是在對(duì)傳統(tǒng)的肝臟模型進(jìn)行改進(jìn)和創(chuàng)新的基礎(chǔ)上實(shí)現(xiàn)的。傳統(tǒng)的肝臟模型通常是基于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)或體外細(xì)胞培養(yǎng)的方法,但這些方法存在著很多的局限性和缺陷。例如,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)不僅存在著倫理和道德問(wèn)題,而且還存在著種屬差異、生理反應(yīng)差異等問(wèn)題;而體外細(xì)胞培養(yǎng)則存在著細(xì)胞失活、細(xì)胞分化等問(wèn)題。因此,Organ-on-a-chip的出現(xiàn),填補(bǔ)了這些傳統(tǒng)方法的空白,為科學(xué)研究和工業(yè)應(yīng)用提供了更加可靠和有效的手段。中山鵝原代肝細(xì)胞提取原代肝細(xì)胞是一種重要的研究工具,可以為肝臟疾病的研究和攻克提供有力的支持。
貼壁培養(yǎng)的原代肝細(xì)胞是酶誘導(dǎo)研究的重要模型。這種模型可以通過(guò)倍數(shù)變化方法來(lái)評(píng)估藥物是否為酶的誘導(dǎo)劑。具體來(lái)說(shuō),研究人員可以使用已知的陽(yáng)性和陰性對(duì)照藥物來(lái)校準(zhǔn)體外系統(tǒng),然后將研究藥物與細(xì)胞共孵育,測(cè)定孵育后CYP酶的mRNA表達(dá)水平倍數(shù)變化,以評(píng)估藥物是否為酶的誘導(dǎo)劑。這種方法可以幫助研究人員更好地了解藥物相互作用的機(jī)制,從而更好地指導(dǎo)臨床用藥。 酶誘導(dǎo)是一種藥物相互作用的現(xiàn)象,指某些化合物能夠提高肝臟藥物代謝酶的活性,從而導(dǎo)致合用的藥物代謝速率加快,使得原藥的血藥濃度下降,進(jìn)而使其療效降低或喪失。這種現(xiàn)象在臨床上非常常見(jiàn),因?yàn)樵S多藥物都需要通過(guò)肝臟代謝酶來(lái)進(jìn)行代謝,而酶誘導(dǎo)會(huì)影響這些代謝酶的活性,從而影響藥物的代謝。 酶誘導(dǎo)的機(jī)制是通過(guò)影響肝臟細(xì)胞內(nèi)的CYP酶的表達(dá)和活性來(lái)實(shí)現(xiàn)的。CYP酶是肝臟細(xì)胞內(nèi)重要的藥物代謝酶之一,它能夠代謝許多藥物和毒物,從而使它們被代謝出體外。當(dāng)某些化合物進(jìn)入體內(nèi)后,它們會(huì)與CYP酶結(jié)合并使它們的特異性表達(dá),從而使得CYP酶能夠更快地代謝藥物和毒物,使其被代謝出體外。 原代肝細(xì)胞依舊是目前理想的體外模型,是藥物代謝研究的重要組成部分。
如何提高原代肝細(xì)胞的存活率?原代肝細(xì)胞是指直接從生物體肝臟中分離出來(lái)的肝細(xì)胞,其存活率的提高可以通過(guò)以下方法實(shí)現(xiàn):1.選擇合適的分離方法:選擇合適的分離方法可以提高原代肝細(xì)胞的存活率。例如,可以使用膠原酶消化法或機(jī)械分離法等方法分離肝細(xì)胞。2.控制培養(yǎng)條件:原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)條件對(duì)其存活率有很大影響。例如,培養(yǎng)溫度、濕度、氧氣含量、培養(yǎng)基成分等都需要嚴(yán)格控制。3.使用合適的培養(yǎng)基:選擇合適的培養(yǎng)基可以提高原代肝細(xì)胞的存活率。例如,可以使用含有肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子、胰島素等成分的培養(yǎng)基。4.控制細(xì)胞密度:原代肝細(xì)胞的密度對(duì)其存活率也有很大影響。如果細(xì)胞密度過(guò)高,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞缺氧和營(yíng)養(yǎng)不足,從而降低存活率。因此,需要控制細(xì)胞密度,使其保持在適當(dāng)?shù)姆秶鷥?nèi)。5.添加細(xì)胞保護(hù)劑:添加細(xì)胞保護(hù)劑可以提高原代肝細(xì)胞的存活率。例如,可以添加谷胱甘肽、維生素E等抗氧化劑,以減少細(xì)胞氧化損傷。6.定期更換培養(yǎng)基:定期更換培養(yǎng)基可以防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累和營(yíng)養(yǎng)不足,從而提高原代肝細(xì)胞的存活率??傊岣咴渭?xì)胞的存活率需要綜合考慮多種因素,包括分離方法、培養(yǎng)條件、培養(yǎng)基、細(xì)胞密度、細(xì)胞保護(hù)劑等。 立沃生物的原代肝細(xì)胞配套有多種細(xì)胞培養(yǎng)試劑,包括細(xì)胞培養(yǎng)基、細(xì)胞因子等,為后續(xù)研究保駕護(hù)航。
近年來(lái),隨著細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,原代肝細(xì)胞在基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用的作用越來(lái)越重要,取得了一系列重要進(jìn)展。 首先,原代肝細(xì)胞在肝臟發(fā)育和再生方面的研究中發(fā)揮了重要作用。研究表明,原代肝細(xì)胞可以分化為多種肝細(xì)胞類(lèi)型,如肝細(xì)胞、膽管細(xì)胞和星形細(xì)胞等,從而為肝臟發(fā)育和再生提供了重要的細(xì)胞來(lái)源。此外,原代肝細(xì)胞還可以通過(guò)體外培養(yǎng)和移植等方法促進(jìn)肝臟再生和修復(fù)。 其次,原代肝細(xì)胞在肝臟疾病的研究中也有重要應(yīng)用。研究表明,原代肝細(xì)胞可以模擬肝臟疾病的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程,如肝纖維化、liver cancer等,從而為疾病的機(jī)制研究和新藥開(kāi)發(fā)提供了重要的實(shí)驗(yàn)?zāi)P?。此外,原代肝?xì)胞還可以用于篩選和評(píng)價(jià)肝臟疾病的藥物開(kāi)發(fā)。 原代肝細(xì)胞在藥物代謝和毒性研究中也有重要作用。研究表明,原代肝細(xì)胞可以模擬肝臟對(duì)藥物的代謝和毒性反應(yīng),從而為藥物的安全性評(píng)價(jià)和藥代動(dòng)力學(xué)研究提供了重要的實(shí)驗(yàn)?zāi)P汀4送?,原代肝?xì)胞還可以用于篩選和評(píng)價(jià)藥物的代謝和毒性。 原代肝細(xì)胞在基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用前景廣闊,將為肝臟生理和病理的研究以及藥物開(kāi)發(fā)和安全性評(píng)價(jià)等方面提供重要支持立沃生物的原代肝細(xì)胞來(lái)源于不同的動(dòng)物品系,以滿足客戶的個(gè)性化需求。汕尾小鼠原代肝細(xì)胞懸浮
立沃生物的原代肝細(xì)胞活力高,貼壁效果好,現(xiàn)貨供應(yīng),周期短,滿足基礎(chǔ)研究與藥物開(kāi)發(fā)的個(gè)性化需求。北京牛原代肝細(xì)胞圖片
原代肝細(xì)胞的體外擴(kuò)增不是一件容易的事。原代肝細(xì)胞是一種非常重要的細(xì)胞類(lèi)型,具有豐富的酶系和多種特異性功能,因此被大量用于生物化學(xué)、實(shí)驗(yàn)性肝損傷、藥代動(dòng)力學(xué)、毒理學(xué)和cancer等研究。然而,這些細(xì)胞在體外的存活能力非常有限,所以分離并培養(yǎng)出高活性的原代肝細(xì)胞并不是一件容易的事情。 分離高質(zhì)量的原代肝細(xì)胞,需要采用一系列復(fù)雜的技術(shù)和方法。首先,需要選擇合適的動(dòng)物模型,以獲得足夠數(shù)量的肝組織。然后,需要對(duì)肝組織進(jìn)行消化和分離,通常使用的方法包括機(jī)械分離、膠原酶消化、胰蛋白酶消化等。在分離過(guò)程中,需要注意避免對(duì)細(xì)胞的損傷,以保證細(xì)胞的活力和功能完整性。 分離出的原代肝細(xì)胞也需要按照嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行培育。原代肝細(xì)胞需要在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng),以提供必要的營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)因子。在培養(yǎng)過(guò)程中,需要注意細(xì)胞的密度、溫度、氧氣濃度、pH值等因素,以保證細(xì)胞的正常生長(zhǎng)和分化。此外,還需要添加適當(dāng)?shù)乃幬锖突衔?,以模擬體內(nèi)的生理環(huán)境和病理狀態(tài),以便進(jìn)行相關(guān)研究。 分離并培養(yǎng)出高活性的原代肝細(xì)胞是進(jìn)行肝臟相關(guān)研究的關(guān)鍵步驟之一。雖然這個(gè)過(guò)程非常復(fù)雜和困難,但是通過(guò)不斷的努力和創(chuàng)新,我們相信會(huì)有更多的突破和進(jìn)展。北京牛原代肝細(xì)胞圖片