保存溫度是影響原代肝細胞存活和功能的關(guān)鍵因素之一。一般來說,原代肝細胞的保存溫度為4℃,但是在這種溫度下,細胞的代謝活動仍然會繼續(xù)進行,導(dǎo)致細胞的壽命有限。因此,為了延長原代肝細胞的壽命,可以將其保存在低溫下,如-80℃或液氮中。這種保存方式可以有效地減緩細胞的代謝活動,延長細胞的壽命,但是在保存過程中需要注意加入凍存液,防止細胞凍結(jié)損傷。 原代肝細胞的運輸也是一個重要的問題。在運輸過程中,細胞可能會受到振動、溫度變化、氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)的缺乏等不利因素的影響,導(dǎo)致細胞失活或功能受損。為了保證細胞的完整性和功能性,可以采用液氮運輸?shù)姆绞?,即在低溫下運輸細胞。在運輸前給細胞提供充足的營養(yǎng)和氧氣,也可以增強其抵抗不利因素的能力。原代肝細胞的研究可以幫助人們了解肝臟的功能和疾病,從而了解肝臟疾病的發(fā)生和發(fā)展,為其攻克提供可能。深圳中國人原代肝細胞純化
不同物種的原代肝細胞在貼壁時間上存在差異。以小鼠為例,其原代肝細胞可能在培養(yǎng)基中需1個小時開始貼壁,而其他物種則需要4-6小時左右。這是由于不同物種的細胞形態(tài)、生理特性和培養(yǎng)條件等因素的影響。 在進行原代肝細胞培養(yǎng)時,貼壁時間是一個重要的指標。一般來說,原代肝細胞在培養(yǎng)基中貼壁后,細胞的代謝活性和功能會得到提高,因此貼壁時間越短,細胞的生物學活性就越高。但是,如果貼壁時間過短,細胞可能會出現(xiàn)脫落或死亡等情況,因此需要根據(jù)具體情況進行調(diào)整。 另外,原代肝細胞的貼壁能力也與細胞的新鮮程度有關(guān)。新鮮分離的原代肝細胞一般需要4-6小時才能貼壁,而經(jīng)過冷凍保存的細胞則需要更長的時間。因此,在進行原代肝細胞培養(yǎng)時,需要根據(jù)細胞的新鮮程度和貼壁時間進行合理的調(diào)整。 需要注意的是,幾乎所有物種的原代肝細胞都可以貼壁,但不同物種的細胞在培養(yǎng)條件和培養(yǎng)基配方等方面存在差異。因此,在進行原代肝細胞培養(yǎng)時,需要根據(jù)具體物種和實驗要求進行合理的選擇和調(diào)整,以確保細胞的生物學活性和代謝功能得到有效的發(fā)揮。深圳中國人原代肝細胞純化立沃生物同批次的原代肝細胞具有高度的穩(wěn)定性和可重復(fù)性,可以為客戶提供穩(wěn)定的實驗結(jié)果。
原代肝細胞比較常用的模型是二維模型。在膠原包被的培養(yǎng)板上,原代肝細胞可貼壁培養(yǎng),同樣高密度培養(yǎng)有助于肝細胞分化狀態(tài)的維持。但原代肝細胞在體外的培養(yǎng)時間較短,人原代肝細胞在體外培養(yǎng)3天內(nèi)可保持乙肝病毒易感性,培養(yǎng)兩周發(fā)生明顯的去分化以及細胞凋亡情況。北京大學鄧宏魁教授發(fā)表在《科學》上的數(shù)據(jù)顯示,通過添加5種小分子化合物抑制原代肝細胞去分化進程,可在體外長期維持肝細胞的分化狀態(tài),維持時間長達八周。那為什么原代肝細胞在體外容易去分化呢?肝細胞在體外缺乏了肝細胞與肝非實質(zhì)細胞的交流,又或者缺乏了肝臟的三維結(jié)構(gòu)?;谝陨蠁栴}與分析,我在碩士期間開展了肝細胞與肝非實質(zhì)細胞的共培養(yǎng)工作。結(jié)果顯示,通過共培養(yǎng),原代肝細胞可在體外長期培養(yǎng),并在鋪板后的72天內(nèi)仍然保持了乙肝病毒的易感性,說明缺乏細胞間交流是原代肝細胞發(fā)生去分化的原因之一。到目前為止,原代肝細胞體外維持四個月的時間記錄仍然沒有被打破。
肝細胞是人體內(nèi)重要的細胞之一,扮演著重要的代謝作用。然而,由于肝細胞的特殊性質(zhì),使得它們在體外的培養(yǎng)和研究變得非常困難。為了解決這個問題,科學家們開發(fā)了許多不同的肝細胞培養(yǎng)方法,其中包括貼壁培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng)。 隨著3D培養(yǎng)技術(shù)的出現(xiàn),原代肝細胞的應(yīng)用范圍也進一步得到了擴展。3D培養(yǎng)是一種將細胞培養(yǎng)在三維空間中的方法,可以更好地模擬體內(nèi)的情況。在3D培養(yǎng)中,肝細胞可以形成復(fù)雜的結(jié)構(gòu),從而更好地模擬體內(nèi)的情況。此外,3D培養(yǎng)還可以使原代肝細胞更好地保持其原有的形態(tài)和功能,從而更好地研究肝細胞的生理和病理過程。 原代肝細胞的培養(yǎng)和研究對于了解肝臟的生理和病理過程至關(guān)重要。不同的原代肝細胞培養(yǎng)方法各有優(yōu)缺點,科學家們需要根據(jù)具體的研究目的選擇合適的方法。隨著3D培養(yǎng)技術(shù)的不斷發(fā)展,相信原代肝細胞的研究將會更加深入。代肝細胞的研究將會更加深入,為藥物研發(fā)和毒理學研究提供更加準確的數(shù)據(jù)和依據(jù)。原代肝細胞是一種從新鮮肝臟組織中分離出來的細胞,高度保留了肝臟本身的酶水平和功能。。
原代肝細胞也被多方面應(yīng)用于嵌合體肝模型當中。通過將正常人原代肝細胞移植到患有嚴重聯(lián)合免疫缺陷(SCID)的肝特異uPA轉(zhuǎn)基因小鼠中,可以成功地構(gòu)建嵌合體肝。而轉(zhuǎn)基因小鼠的uPA表達能夠促使鼠肝細胞死亡,從而為人原代肝細胞的移植、重建和增殖提供了一個適宜的微環(huán)境。在這種重建的嵌合體肝內(nèi),人肝細胞占據(jù)了大約75%的比例,并且能夠持續(xù)高水平地表達人血清蛋白。通過使用病人血清和病毒核酸影響這種嵌合體小鼠,研究人員發(fā)現(xiàn)在肝內(nèi)可以檢測到病毒的RNA。然而,病理觀察并未發(fā)現(xiàn)病毒影響所導(dǎo)致的細胞病變。這一發(fā)現(xiàn)為研究病毒影響的機制提供了新的途徑,并為開發(fā)解決病毒影響的新方法提供了新的思路。此外,這項研究還為研究肝細胞移植和重建提供了新的實驗?zāi)P汀Mㄟ^將人原代肝細胞移植到轉(zhuǎn)基因小鼠中,研究人員可以更好地研究原代肝細胞的生長、分化和功能,從而為克服肝病提供新的思路和方法。這項研究的結(jié)果具有重要的臨床意義,有望為克服肝病和病毒影響提供新的策略。貼壁原代肝細胞主要用于肝臟再生研究、肝臟3D打印、肝臟疾病研究、HBV、HCV病毒研究等。天津鴨原代肝細胞純化
立沃生物的原代肝細胞可以提供多種檢測服務(wù),包括細胞活率、細胞數(shù)、endotoxin檢測等。深圳中國人原代肝細胞純化
原代肝細胞是肝臟研究和藥物研發(fā)的“金標準”細胞模型。原代肝細胞是從機體內(nèi)分離出來的肝細胞,經(jīng)過立即培養(yǎng)或凍存處理后得到的細胞。這種細胞保留了肝細胞原始的生理功能和分化狀態(tài),因此被廣泛應(yīng)用于肝臟研究和藥物研發(fā)領(lǐng)域。相比于其他肝細胞模型,原代肝細胞具有更高的可靠性和生物學真實性,能夠更準確地反映肝臟的生理和病理狀態(tài)。除此之外,原代肝細胞還具有良好的可塑性和可重復(fù)性,可以通過不同的處理方法來模擬不同的肝臟疾病和藥物反應(yīng),為藥物研發(fā)提供了重要的參考和依據(jù)。因此,原代肝細胞被認為是肝臟研究和藥物研發(fā)的“金標準”細胞模型,對于深入了解肝臟生理和病理機制,以及開發(fā)更安全有效的藥物具有重要的意義。深圳中國人原代肝細胞純化