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深圳豬原代肝細(xì)胞懸浮

來源: 發(fā)布時(shí)間:2024-05-13

原代肝細(xì)胞有三種常用的分離方法,每種方法都有對(duì)應(yīng)的原理。原代肝細(xì)胞是從動(dòng)物體內(nèi)分離出來的未經(jīng)過傳代的肝細(xì)胞,具有很高的生物學(xué)活性和生理功能,是研究肝臟生理和病理的重要材料。目前,分離原代肝細(xì)胞的方法有直接剪切法、組織塊消化法和兩步膠原酶灌流法等。其中,兩步膠原酶灌流法是一種比較常用的方法,因?yàn)樗鼘?duì)肝細(xì)胞的損傷作用較小,可以提高肝細(xì)胞的產(chǎn)量和活力。 在兩步膠原酶灌流法中,首先需要使用螯合劑來螯合肝臟中的鐵離子,以避免膠原酶的活性受到抑制。然后,將肝臟灌注膠原酶,使其分解膠原纖維,從而釋放出肝細(xì)胞。這種方法可以分離出數(shù)量多且活力好的肝細(xì)胞,適用于各種動(dòng)物的肝臟,包括小鼠、大鼠、豬等。 直接剪切法是將肝臟切成小塊,將手術(shù)取得的肝組織切成小塊,直接置于簡(jiǎn)單培養(yǎng)液中即可。這種方法簡(jiǎn)單易行,但對(duì)肝細(xì)胞的損傷較大,產(chǎn)量和活力較低。 組織塊消化法是將肝臟切成小塊,然后用胰酶等消化酶消化,分離出肝細(xì)胞。這種方法產(chǎn)量較高,但對(duì)肝細(xì)胞的損傷也較大。 分離原代肝細(xì)胞是肝臟生理和病理研究的重要前提。不同的分離方法各有優(yōu)缺點(diǎn),需要根據(jù)實(shí)際情況選擇合適的方法。立沃生物的原代肝細(xì)胞來源于不同的動(dòng)物品系,以滿足客戶的個(gè)性化需求。深圳豬原代肝細(xì)胞懸浮

原代肝細(xì)胞的體外培養(yǎng)和研究有著很大的應(yīng)用范圍。原代肝細(xì)胞(Primaryhepatocytes)是指從動(dòng)物肝臟取出后立即培養(yǎng)的肝細(xì)胞。原代肝細(xì)胞作為一種體外模型,具有其它體外模型不可替代的優(yōu)點(diǎn):1.與體內(nèi)環(huán)境保持一致,酶量和輔助因子水平都是正常的生理濃度,可以在接近生理狀態(tài)的的情況下研究藥物的代謝和毒性;2.較好保留酶水平和維持了肝細(xì)胞的完整形態(tài)和肝細(xì)胞體外代謝活性,真實(shí)反應(yīng)了體內(nèi)的代謝情況。3.隨著技術(shù)水平的不斷提高,原代培養(yǎng)的動(dòng)物和人肝細(xì)胞已廣泛應(yīng)用于藥物研究:4.探討藥物在肝中的代謝途徑和藥物藥代動(dòng)力學(xué)的研究;5.評(píng)價(jià)藥物和外源性物質(zhì)對(duì)肝臟中細(xì)胞色素P450酶誘導(dǎo)作用并探討其誘導(dǎo)機(jī)制;6.預(yù)測(cè)和解釋藥物與藥物之間的相互作用;7.研究藥物的細(xì)胞毒性等。因此了解或者掌握原代肝細(xì)胞體外培養(yǎng)和研究的相關(guān)技術(shù)對(duì)于提升相關(guān)試驗(yàn)的成功率非常有幫助。東莞中國人原代肝細(xì)胞貼壁利用原代肝臟細(xì)胞進(jìn)行Organoid搭建,還原體內(nèi)肝臟的狀態(tài),能極大地減少實(shí)驗(yàn)的誤差和傳統(tǒng)藥篩的成本。

人原代肝細(xì)胞是一種非常重要的細(xì)胞類型,因?yàn)樗鼈兛梢阅M肝臟的生理和代謝特性。在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)條件下,這些細(xì)胞可以保持分化并對(duì)誘導(dǎo)劑做出反應(yīng),這使得它們成為評(píng)估CYP酶誘導(dǎo)重要的模型之一。 人原代肝細(xì)胞由核受體、coactivator和抑制因子、靶基因和啟動(dòng)子以及藥物代謝酶等組成。這些特性使得人原代肝細(xì)胞能夠有效地模擬候選藥物及其代謝物的誘導(dǎo)性,從而為藥物研發(fā)提供了重要的參考和指導(dǎo)。 此外,人原代肝細(xì)胞還具有許多其他優(yōu)點(diǎn)。比如在體外進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng),從而可以提高藥物篩選的效率,還可以用于研究肝臟疾病的發(fā)病機(jī)制,以及評(píng)估藥物對(duì)肝臟的毒性和安全性。 人原代肝細(xì)胞是一種非常重要的細(xì)胞類型,它們可以模擬肝臟的生理和代謝特性,為藥物研發(fā)提供了重要的參考和指導(dǎo)。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步,相信人們對(duì)人原代肝細(xì)胞的研究和應(yīng)用會(huì)越來越深入,為人類健康事業(yè)做出更大的貢獻(xiàn)。

貼壁培養(yǎng)是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)方法,可以使原代肝細(xì)胞在培養(yǎng)皿表面附著生長(zhǎng),形成單層細(xì)胞群落。原代肝細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)需要注意以下幾點(diǎn): 1. 分離和準(zhǔn)備細(xì)胞:從新鮮的動(dòng)物肝臟中分離出原代肝細(xì)胞后,需要進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和質(zhì)量檢測(cè),確保細(xì)胞數(shù)量和質(zhì)量符合要求。 2. 培養(yǎng)基的選擇:原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)基需要選擇適合其生長(zhǎng)和代謝的培養(yǎng)基,常用的培養(yǎng)基包括DMEM、RPMI-1640等。 3. 培養(yǎng)皿的涂層:為了使原代肝細(xì)胞能夠附著生長(zhǎng),需要在培養(yǎng)皿表面涂層一定濃度的膠原蛋白、明膠或者其他細(xì)胞黏附因子。 4. 細(xì)胞接種和培養(yǎng):將準(zhǔn)備好的原代肝細(xì)胞接種到涂層好的培養(yǎng)皿中,加入適量的培養(yǎng)基,放入恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。需要注意的是,原代肝細(xì)胞的培養(yǎng)時(shí)間較短,一般在3-5天左右,因此需要及時(shí)更換培養(yǎng)基和進(jìn)行細(xì)胞觀察。 原代肝細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)可以通過在培養(yǎng)皿上加一定的的吸附涂層來達(dá)到讓原代肝細(xì)胞快速貼壁的效果。立沃生物原代肝細(xì)胞有著嚴(yán)格的體外培養(yǎng)規(guī)范和質(zhì)量監(jiān)測(cè)機(jī)制,努力讓客戶收到的每一管細(xì)胞都放心的。

細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)成分可以讓原代肝細(xì)胞在培養(yǎng)皿中貼壁效果更好。例如膠原蛋白、基質(zhì)膠或人纖維鏈接蛋白,這些成分可以模擬細(xì)胞在人體內(nèi)所處的微環(huán)境,從而提升細(xì)胞的狀態(tài)和生長(zhǎng)能力。 膠原蛋白是一種重要的細(xì)胞外基質(zhì)成分,它可以提供細(xì)胞所需的支撐和結(jié)構(gòu)。在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中,加入膠原蛋白可以讓原代肝細(xì)胞更好地附著在培養(yǎng)皿上,從而促進(jìn)原代肝細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化。 基質(zhì)膠是一種含有多種細(xì)胞外基質(zhì)成分的復(fù)合物,它可以提供更加復(fù)雜和多樣化的細(xì)胞外環(huán)境。在原代肝細(xì)胞培養(yǎng)中,加入基質(zhì)膠可以模擬細(xì)胞在人體內(nèi)所處的復(fù)雜環(huán)境,從而提高細(xì)胞的適應(yīng)性和生長(zhǎng)能力。此外,基質(zhì)膠還可以促進(jìn)細(xì)胞間的相互作用和信號(hào)傳遞,從而增強(qiáng)原代肝細(xì)胞的功能和穩(wěn)定性。 人纖維鏈接蛋白是一種重組的細(xì)胞外基質(zhì)成分,它可以提供細(xì)胞所需的支撐和結(jié)構(gòu)。 加入細(xì)胞外基質(zhì)成分可以可以模擬細(xì)胞在人體內(nèi)所處的微環(huán)境,讓原代肝細(xì)胞在培養(yǎng)皿中更好地生長(zhǎng)和分化,從而提高細(xì)胞的狀態(tài)和穩(wěn)定性。原代肝細(xì)胞可以用于有關(guān)藥物代謝、毒理、靶向誘導(dǎo)相關(guān)的實(shí)驗(yàn),是有效的體外實(shí)驗(yàn)?zāi)P?。汕尾牛原代肝?xì)胞純化

立沃生物的原代肝細(xì)胞配套有有多種細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)支持,可以為客戶提供多維度的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)支持解決方案。深圳豬原代肝細(xì)胞懸浮

原代肝細(xì)胞由于自身良好的體外重現(xiàn)性,以及保持了高度的酶水平,在藥物篩選中發(fā)揮著重要作用。原代肝細(xì)胞可以用于藥物代謝動(dòng)力學(xué)、藥物毒性評(píng)估和藥物相互作用研究等方面。原代肝細(xì)胞可以更準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)藥物的代謝和毒性,因此在藥物研發(fā)領(lǐng)域中具有廣泛的應(yīng)用前景。 原代肝細(xì)胞還可以用于研究肝病的發(fā)病機(jī)制、診斷和therapeutic method。例如,可以利用原代肝細(xì)胞研究肝細(xì)胞cancer的發(fā)生機(jī)制,探索新的therapeutic method。此外,原代肝細(xì)胞還可以用于研究肝炎病毒的原理和therapeutic method,為肝炎的攻克提供新的思路和方法。 除了在藥物篩選和肝病研究中的應(yīng)用,原代肝細(xì)胞在生物醫(yī)學(xué)研究中也有著廣泛的應(yīng)用。例如,可以利用原代肝細(xì)胞研究肝細(xì)胞的分化和增殖機(jī)制,探索新的therapeutic method。此外,原代肝細(xì)胞還可以用于研究肝臟的生理和病理過程,為肝臟疾病的克服提供新的思路和方法。 原代肝細(xì)胞在藥物篩選、肝病研究和生物醫(yī)學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用前景。它們可以幫助科學(xué)家們更好地了解藥物的代謝和毒性、肝病的發(fā)病機(jī)制和therapeutic method、肝臟的生理和病理過程等方面,為人類健康事業(yè)做出重要的貢獻(xiàn)。深圳豬原代肝細(xì)胞懸浮