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原代肝細胞體外培養(yǎng)一般培養(yǎng)在瓶皿等容器中,根據(jù)它們是否能貼附在支持物上生長的特性,可分為懸浮型和貼壁型兩大類。 原代肝細胞懸浮生長時可以呈單個細胞或細小的細胞團,胞體為圓形。其優(yōu)點是在培養(yǎng)液中生長,生存空間大,允許長時間生長,便于大量繁殖。正常貼壁原代肝細胞具有接觸抑制和密度抑制的雙重特性,細胞相互接觸后可抑制細胞的運動,因此細胞不會相互重疊于其上面生長。細胞生長、匯合成片后,雖發(fā)生接觸抑制,但只要營養(yǎng)充分,仍可增殖分裂,但當(dāng)細胞數(shù)量達到一定密度后,由于營養(yǎng)的枯竭和代謝物的影響,細胞分裂停止,稱為密度抑制。 當(dāng)肝細胞被分離后,可以進行懸浮培養(yǎng)或貼壁培養(yǎng)。懸浮培養(yǎng)的原代肝細胞在開始的4~6h內(nèi)細胞色素P450酶的活性和體內(nèi)一致,隨時間的延長而迅速下降,故懸浮肝細胞一般用于代謝穩(wěn)定性研究或代謝物譜研究。貼壁培養(yǎng)的原代肝細胞有足夠的時間從損傷中恢復(fù)過來,保持了正常肝細胞的生物學(xué)特征及代謝活性,一般用于酶誘導(dǎo)研究、藥物細胞毒性研究、慢代謝藥物的代謝穩(wěn)定性或產(chǎn)物推斷研究。立沃生物的原代肝細胞配套提供完備的細胞培養(yǎng)服務(wù),為客戶提供個性化的解決方案,使客戶滿意放心。廣州新西蘭兔原代肝細胞
原代肝細胞是藥物早期研究的金標(biāo)準(zhǔn)細胞模型。藥物通過肝臟代謝后,大多數(shù)藥物的毒性被消除,但同時也有一些無毒或低毒的物質(zhì)通過生物轉(zhuǎn)化后轉(zhuǎn)變成有毒甚至毒性更大的物質(zhì),因此肝臟便必然成為研究藥物毒性的重要target organ。原代肝細胞即為一個較好的篩選模型,尤其是在檢測結(jié)構(gòu)相關(guān)化合物時,原代肝細胞的角色更為重要。 人原代肝細胞是重要的體外模型。人原代肝細胞在較大程度上保留了細胞在體內(nèi)organ里的功能,各種物質(zhì)代謝功能和酶活性與體內(nèi)的肝細胞極其相似,是較為接近臨床的一種標(biāo)準(zhǔn)體外短期培養(yǎng)模型。人原代肝細胞通常從肝或肝組織中獲得,一般在肝切除手術(shù)中或者肝移植后排斥的肝組織中獲取,隨后即時進行研究或者凍存待用。 原代肝細胞是肝臟疾病的研究以及相應(yīng)藥物的開發(fā)的重要載體。比如一些對于乙肝病毒的研究需要對肝細胞進行體外培養(yǎng);一些嚴(yán)重肝臟疾病的細胞移植研究也要涉及到對原代肝細胞進行大量擴增。因此,原代肝細胞的體外培養(yǎng)和研究是一直以來科學(xué)家們關(guān)注的熱點。中山魚原代肝細胞培養(yǎng)方法立沃生物科技有限公司的原代肝細胞是一種擁有肝臟組織特點與特性的的細胞產(chǎn)品,具有良好的應(yīng)用前景。
近年來,隨著細胞培養(yǎng)技術(shù)和分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,原代肝細胞在基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用的作用越來越重要,取得了一系列重要進展。首先,原代肝細胞在肝臟發(fā)育和肝臟再生方面的研究中發(fā)揮了重要作用。研究表明,原代肝細胞可以分化為多種肝細胞類型,如肝細胞、膽管細胞和星形細胞等,從而為肝臟發(fā)育和再生提供了重要的細胞來源。此外,原代肝細胞還可以通過體外培養(yǎng)和移植等方法促進肝臟再生和修復(fù)。其次,原代肝細胞在肝臟疾病的研究中也有重要應(yīng)用。研究表明,原代肝細胞可以模擬肝臟疾病的發(fā)生和發(fā)展過程,如肝纖維化、livercancer等,從而為疾病的機制研究和新藥開發(fā)提供了重要的實驗?zāi)P?。此外,原代肝細胞還可以用于篩選和評價肝臟疾病的藥物開發(fā)。原代肝細胞在藥物代謝和毒性研究中也有重要作用。研究表明,原代肝細胞可以模擬肝臟對藥物的代謝和毒性反應(yīng),從而為藥物的安全性評價和藥代動力學(xué)研究提供了重要的實驗?zāi)P?。此外,原代肝細胞還可以用于篩選和評價藥物的代謝和毒性。原代肝細胞在基礎(chǔ)研究中的應(yīng)用前景廣闊,將為肝臟生理和病理的研究以及藥物開發(fā)和安全性評價等方面提供重要支持。
在進行原代肝細胞培養(yǎng)時,通常需要對分離得到的肝細胞進行特殊的處理或篩選,以提高肝細胞的存活率和純度。以下是一些常見的處理或篩選方法:1.密度梯度離心:密度梯度離心是一種常用的分離和篩選肝細胞的方法。通過使用密度梯度介質(zhì)(如Percoll或Ficoll),可以將肝細胞與其他細胞分離出來,從而提高肝細胞的純度。2.選擇性貼壁:選擇性貼壁是一種基于肝細胞和其他細胞在培養(yǎng)皿上的貼壁特性不同的篩選方法。肝細胞通常會在培養(yǎng)皿上貼壁生長,而其他細胞則不會。通過選擇合適的培養(yǎng)條件和時間,可以篩選出貼壁生長的肝細胞。3.流式細胞術(shù):流式細胞術(shù)是一種基于細胞表面標(biāo)志物的篩選方法。通過使用熒光標(biāo)記的抗體,可以識別和篩選出表達特定標(biāo)志物的肝細胞。4.細胞篩選:細胞篩選是一種基于細胞形態(tài)和功能的篩選方法。通過觀察細胞的形態(tài)和功能特征,可以篩選出符合要求的肝細胞。以上是一些常見的原代肝細胞處理或篩選方法,不同的方法適用于不同的實驗需求和研究目的。在進行原代肝細胞培養(yǎng)時,需要根據(jù)具體情況選擇合適的處理或篩選方法,以提高肝細胞的存活率和純度。提高原代肝細胞的活率需要綜合考慮多個因素:細胞培養(yǎng)條件、細胞來源、細胞分離方法、培養(yǎng)基成分等。
endotoxin對原代肝細胞的培養(yǎng)有著重要的影響。endotoxin是一種細菌產(chǎn)生的有害物質(zhì),它可以對原代肝細胞的培養(yǎng)產(chǎn)生不良影響。在進行原代肝細胞的培養(yǎng)過程中,endotoxin的存在會導(dǎo)致細胞的凋亡、細胞周期的停滯、細胞功能的異常等問題。 endotoxin的存在會引起細胞內(nèi)炎癥反應(yīng),導(dǎo)致細胞的凋亡。endotoxin可以打通細胞內(nèi)的炎癥信號通路,導(dǎo)致細胞內(nèi)產(chǎn)生大量的炎癥因子,如腫瘤壞死因子、白細胞介素等。這些炎癥因子會引起細胞的凋亡,從而影響原代肝細胞的培養(yǎng)。 endotoxin的存在還會導(dǎo)致細胞周期的停滯。endotoxin可以抑制細胞周期的進程,使得細胞無法正常分裂和增殖。這會導(dǎo)致細胞的數(shù)量無法增加,從而影響原代肝細胞的培養(yǎng)。 endotoxin的存在還會影響細胞的功能。endotoxin可以影響細胞的代謝、分泌和信號傳導(dǎo)等功能,從而影響原代肝細胞的生理和病理過程。這會導(dǎo)致研究人員無法得到準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,從而影響對肝臟生理和病理的研究。 因此,在進行原代肝細胞的培養(yǎng)過程中,需要注意endotoxin的存在。可以采用endotoxin去除劑等方法去除endotoxin,從而保證原代肝細胞的正常生長和功能。立沃生物的原代肝細胞配套提供多種細胞培養(yǎng)質(zhì)量控制服務(wù),包括細胞培養(yǎng)質(zhì)量檢測、細胞培養(yǎng)質(zhì)量評估等。江蘇食蟹猴原代肝細胞培養(yǎng)方法
原代肝細胞保留了肝細胞原始的生理功能與酶水平,是肝臟研究與藥物研發(fā)的“金標(biāo)準(zhǔn)”細胞模型。廣州新西蘭兔原代肝細胞
人原代肝細胞是一種非常重要的細胞類型,因為它們可以模擬肝臟的生理和代謝特性。在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)條件下,這些細胞可以保持分化并對誘導(dǎo)劑做出反應(yīng),這使得它們成為評估CYP酶誘導(dǎo)重要的模型之一。 人原代肝細胞由核受體、coactivator和抑制因子、靶基因和啟動子以及藥物代謝酶等組成。這些特性使得人原代肝細胞能夠有效地模擬候選藥物及其代謝物的誘導(dǎo)性,從而為藥物研發(fā)提供了重要的參考和指導(dǎo)。 此外,人原代肝細胞還具有許多其他優(yōu)點。比如在體外進行大規(guī)模培養(yǎng),從而可以提高藥物篩選的效率,還可以用于研究肝臟疾病的發(fā)病機制,以及評估藥物對肝臟的毒性和安全性。 人原代肝細胞是一種非常重要的細胞類型,它們可以模擬肝臟的生理和代謝特性,為藥物研發(fā)提供了重要的參考和指導(dǎo)。隨著技術(shù)的不斷進步,相信人們對人原代肝細胞的研究和應(yīng)用會越來越深入,為人類健康事業(yè)做出更大的貢獻。廣州新西蘭兔原代肝細胞