qPCR法rcAAV復(fù)制型腺相關(guān)病毒檢測產(chǎn)品的特點：①檢測靈敏度：qPCR法可以達(dá)到非常低的檢測靈敏度，這種高靈敏度可以有效地避免rcAAV復(fù)制型腺相關(guān)病毒對患者的潛在風(fēng)險。②特異性：qPCR法的特異性非常高，通過選擇性擴(kuò)增和特異性引物的設(shè)計，可以排除其他污染源對結(jié)果的干擾。③標(biāo)準(zhǔn)曲線：為了準(zhǔn)確定量rcAAV的拷貝數(shù)，需要建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)曲線是通過已知濃度的rcAAV標(biāo)準(zhǔn)品制備的，通過測定PCR產(chǎn)物的閾值周期數(shù)（Ct值），與已知濃度的rcAAV標(biāo)準(zhǔn)品的對應(yīng)關(guān)系，建立起濃度和Ct值之間的線性關(guān)系。復(fù)制型慢病毒檢測請聯(lián)系南京正揚。深圳qPCR法病毒檢測試劑盒

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qPCR法RCL/RCR病毒檢測：目前許多CAR-T企業(yè)采用Q-PCR方法直接測定CAR-T終產(chǎn)品中的VSV-G序列或psi-gag序列，因考慮到CAR-T細(xì)胞種產(chǎn)品一般需要新鮮輸注的特殊情況，基于細(xì)胞培養(yǎng)法的RCL/RCR檢測方法周期較長，建議在細(xì)胞產(chǎn)品制備過程中進(jìn)行多面控制(如對慢病毒載體及生產(chǎn)終末細(xì)胞采用基于細(xì)胞培養(yǎng)方法測定RCL/RCR，以確保生產(chǎn)工藝過程中不存在RCL的風(fēng)險)，細(xì)胞終產(chǎn)品階段可采用qPCR檢測法快速放行。qPCR法RCL/RCR病毒檢測：目前許多CAR-T企業(yè)采用Q-PCR方法直接測定CAR-T終產(chǎn)品中的VSV-G序列或psi-gag序列，因考慮到CAR-T細(xì)胞種產(chǎn)品一般需要新鮮輸注的特殊情況，基于細(xì)胞培養(yǎng)法的RCL/RCR檢測方法周期較長，建議在細(xì)胞產(chǎn)品制備過程中進(jìn)行多面控制(如對慢病毒載體及生產(chǎn)終末細(xì)胞采用基于細(xì)胞培養(yǎng)方法測定RCL/RCR，以確保生產(chǎn)工藝過程中不存在RCL的風(fēng)險)，細(xì)胞終產(chǎn)品階段可采用qPCR檢測法快速放行。。

南京正揚生物科技有限公司自主研發(fā)生產(chǎn)的復(fù)制型腺相關(guān)病毒檢測試劑盒簡介：rcAAV檢測試劑盒（PCR熒光探針法）是一款既適用于基于細(xì)胞培養(yǎng)法對rcAAV的檢測，也適用于對rcAAV的直接檢測的試劑盒，可達(dá)到兩種方法間相互驗證、相互補(bǔ)充的目的。試劑盒中Reference基因和Target基因包含在同一定量參考品中，可同時實現(xiàn)對rAAV載體和rcAAV濃度快速、靈敏、特異性的定量檢測。檢測樣品包含生產(chǎn)重組腺相關(guān)病毒的原液或終產(chǎn)品以及基于細(xì)胞培養(yǎng)法檢測rcAAV的細(xì)胞樣品。復(fù)制型病毒檢測試劑盒方法有哪些？

美國FDA2020年發(fā)布的關(guān)于RCR/RCL病毒檢測指南提出：對于RCR/RCL的檢測包含指示細(xì)胞培養(yǎng)法、ELISA法(p24蛋白測定)、PCR/Q-PCR法（通過psi-gag或VSV-G聚合酶鏈反應(yīng)）、PERT法（產(chǎn)物增強(qiáng)性逆轉(zhuǎn)錄檢測法）共4種檢測方法。其中，指示細(xì)胞培養(yǎng)法和Q-PCR法較常用，但各國監(jiān)管機(jī)構(gòu)推薦并且可以接受的方法還是以指示細(xì)胞培養(yǎng)法為準(zhǔn)。由于細(xì)胞產(chǎn)品一般要新鮮輸注或快速凍存的特殊性，可使用Q-PCR法先進(jìn)行質(zhì)控放行，但指示細(xì)胞培養(yǎng)法應(yīng)同時進(jìn)行確認(rèn)。復(fù)制型病毒檢測試劑盒要求有哪些？rcAAV病毒檢測原理

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目前針對RCL復(fù)制型慢病毒檢測的方法差異很大，例如，實時定量PCR方法(Q-PCR法)會因為細(xì)胞或質(zhì)粒DNA殘留導(dǎo)致假陽性；合胞體形成測定法需要慢病毒具有完整的能力并且包含Env元件，該方法的靈敏度還未得到驗證；標(biāo)志物補(bǔ)救測定法尚不清楚來自載體生產(chǎn)過程中的RCL是否會濟(jì)活標(biāo)志物；逆轉(zhuǎn)錄酶活性測定法(PERT)不能區(qū)分RCL和載體顆粒，且細(xì)胞中固有的內(nèi)源性  病毒顆粒也會影響檢測結(jié)果的判斷；細(xì)胞培養(yǎng)法檢測時間過長。如您有需要，歡迎聯(lián)系！深圳qPCR法病毒檢測試劑盒