網站導航
SCARB2如何調控MYC轉錄活性？
SCARB2如何調控MYC轉錄活性？
第一步，SCARB2是否影響MYC蛋白修飾
翻譯后修飾在控制MYC的表達和活性中起關鍵作用。Anti-MYC IP-WB實驗發(fā)現，SCARB2正向調控MYC蛋白乙?；揎椝剑▓D1d)。定量質譜(MS)蛋白質組學發(fā)現，MYC的賴氨酸(K) 148和326乙?；脑赟CARB2過表達組富集。構建MYC-K148R和K326R突變體，anti-MYC IP-WB 實驗發(fā)現，過表達SCARB2只減弱MYC-K148R乙酰化修飾水平（圖1e）。表明SCARB2上調MYC-K148乙酰化。
第二步，SCARB2通過何種分子影響MYC蛋白乙酰化修飾
研究表明p300、HDACs、KAT5、SIRT1和GCN5以直接和間接的方式影響MYC的乙酰化和去乙?；Ｍㄟ^IP-WB篩選發(fā)現，過表達SCARB2可恢復由去乙酰化酶HDAC3介導的MYC乙?；档停▓D1f），表明SCARB2主要以HDAC3依賴的方式影響MYC乙?；?。
第三步，MYC蛋白乙酰化修飾影響MYC轉錄活性
熒光素酶實驗顯示，K148R突變降低了MYC的轉錄活性（圖1g）。ChIP-qPCR結果顯示，MYC-K148R突變減少了MYC與其靶基因的結合（圖1h）。研究顯示位于MYC-CT結構域的K148介導MYC與GCN5、KAT5和BRD4等輔因子的相互作用，Co-IP實驗驗證了該結論（圖1i）。功能實驗發(fā)現，MYC-K148R突變的HCCLM3細胞的增殖能力和球形成能力明顯降低（圖1j）。表明，SCARB2增強的MYC-K148乙酰化為關鍵輔因子提供對接位點，對MYC的轉錄活性至關重要（圖1k）。
廣州基云專注互作機制研究，包括免疫沉淀試驗（IP、RIP、CHIP、CHIRP）和蛋白組芯片檢測試驗，協(xié)助輕松突破互作機制，讓科研成果更上一層樓。
如您有相關科研問題，歡迎隨時留言探討。
圖1SCARB2通過MYC-K148位點破壞hdac3介導的MYC去乙?；≧ef. Fig 3/4）
公司信息
我要咨詢
每日熱詞
