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上海偏光成像紡錘體

來源: 發(fā)布時間:2025-05-15

在生殖醫(yī)學領(lǐng)域,卵母細胞冷凍保存技術(shù)作為輔助生殖技術(shù)的重要組成部分,近年來取得了進展。尤其是針對成熟卵母細胞紡錘體的冷凍保存研究,不僅關(guān)乎女性生育能力的保存,還涉及到遺傳學的穩(wěn)定性和安全性。成熟卵母細胞,即處于第二次減數(shù)分裂中期(MII期)的卵母細胞,其內(nèi)部包含一個高度復雜且精細的紡錘體結(jié)構(gòu)。紡錘體由微管組成,這些微管通過動態(tài)變化,將染色體緊密地聯(lián)系在一起,并確保在細胞分裂過程中染色體的正確分離。成熟卵母細胞的紡錘體對溫度變化和機械刺激極為敏感,這使得其冷凍保存過程充滿了挑戰(zhàn)。紡錘體在減數(shù)分裂中也發(fā)揮重要作用,確保生殖細胞染色體正確分離。上海偏光成像紡錘體

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如何觀察紡錘體呢?在普通光學顯微鏡下,人類卵母細胞是半透明的,無法對紡錘體的結(jié)構(gòu)進行觀察和分析。傳統(tǒng)方法是用一種特異的DNA熒光染料對卵母細胞染色,在紫外光下可顯示紡錘體,這種免疫熒光方法對卵母細胞有損傷,不能應用于臨床。為了更好的觀測紡錘體,美國海洋生物學實驗室的R.Oldenbourg等利用紡錘體的雙折射特性,開發(fā)出偏振光顯微鏡?,F(xiàn)今,偏振光顯微鏡已經(jīng)發(fā)展成為一種無創(chuàng)性的觀察和分析紡錘體動態(tài)結(jié)構(gòu)的顯微觀測系統(tǒng),我們也叫它紡錘體觀測儀。它不僅能對雙折射性紡錘體信號的有無進行定性分析,還能對信號的強弱進行定量分析。上海偏光成像紡錘體揭示卵母細胞關(guān)鍵結(jié)構(gòu)紡錘體的形態(tài)在細胞分裂的不同階段會有所變化。

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阿爾茨海默病患者中,微管蛋白(如tau蛋白)的突變和異常磷酸化會影響微管的穩(wěn)定性和紡錘體的組裝,導致染色體分離異常和細胞周期紊亂。紡錘體功能障礙會導致染色體不穩(wěn)定,增加基因組的不穩(wěn)定性,進而影響神經(jīng)元的正常功能和存活。正常情況下,成熟的神經(jīng)元處于G0期,不會重新進入細胞周期。然而,阿爾茨海默病患者中,神經(jīng)元可能會重新進入細胞周期,但由于紡錘體功能障礙,無法完成正常的細胞分裂,導致細胞凋亡。在神經(jīng)元中,紡錘體的正常功能對于神經(jīng)元的發(fā)育、分化和維持至關(guān)重要。

通過抑制細胞周期重新進入,可以減少神經(jīng)元的細胞凋亡,保護神經(jīng)元的存活。例如,使用細胞周期抑制劑(如CDK抑制劑)可以抑制細胞周期重新進入,減少神經(jīng)元的細胞凋亡。此外,通過促進神經(jīng)元的細胞周期退出,也可以減少神經(jīng)元的細胞凋亡。通過改善線粒體功能,可以恢復能量代謝,保護神經(jīng)元的存活。例如,使用線粒體功能增強劑(如輔酶Q10)可以改善線粒體功能,恢復能量代謝。此外,通過減少線粒體的氧化應激,也可以改善線粒體功能。紡錘體微管的動態(tài)變化是細胞分裂周期的重要標志。

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液晶偏振光顯微鏡是一種將液晶可變減速器、電子成像及數(shù)碼成像技術(shù)結(jié)合起來的成像系統(tǒng),能夠觀測到具有雙折性特征的細胞結(jié)構(gòu),如紡錘體和透明帶。Polscope成像系統(tǒng)無需對細胞進行固定和染色,因此能夠評估卵母細胞的質(zhì)量與紡錘體、透明帶等的相關(guān)性。在紡錘體卵冷凍研究中,Polscope成像系統(tǒng)可用于實時監(jiān)測冷凍過程中紡錘體的形態(tài)變化,評估冷凍保護劑的效果和冷凍速率對紡錘體的影響。此外,解凍后也可利用Polscope成像系統(tǒng)評估紡錘體的恢復情況和穩(wěn)定性,從而篩選出高質(zhì)量的卵母細胞進行后續(xù)操作。紡錘體的功能異常與某些藥物的副作用有關(guān),如化療藥物可能干擾紡錘體的形成和功能。上海無需染色紡錘體廠家

紡錘體在細胞分裂后期推動染色體向細胞兩極移動。上海偏光成像紡錘體

紡錘體觀測儀使ICSI更加安全可靠在進行單精子卵胞漿內(nèi)注射(ICSI)授精時,**初人們觀察人體內(nèi)成熟的卵母細胞時,通常認為,卵母細胞紡錘**于***極體附近,故傳統(tǒng)的ICSI操作是轉(zhuǎn)動卵母細胞使其***極**于6點或12點處,然后在3點處注入精子。但是,在大量使用紡錘體觀測儀后發(fā)現(xiàn),***極體并不能很好地預測紡錘體的位置。一項研究提示,在ICSI后,用紡錘體觀測儀觀察紡錘體與***極體的夾角,結(jié)果發(fā)現(xiàn)小于30°這組卵母細胞的正常受精率更高。極體在卵周隙中的移動,或者紡錘體在胞質(zhì)中的易位都使兩者的位置關(guān)系發(fā)生改變,普通光學顯微鏡下ICSI穿刺部位的選擇,可能會損傷紡錘體和(或)造成染色體的異常。通過紡錘體觀測儀,可以精確地對卵母細胞中紡錘體的位置進行定位,從而避免在ICSI過程中損傷紡錘體,使ICSI更加安全可靠。有文獻報道,在進行ICSI時,觀察到“雙折射紡錘體”的成熟卵母細胞的受精率和質(zhì)量胚胎率***高于未觀察到雙折射紡錘體組。也有學者發(fā)現(xiàn),有些卵母細胞在普通光學顯微鏡下看到是正常的,但在紡錘體觀測儀這個“照妖鏡”下,就能顯出原形,表現(xiàn)為有***極體、但缺乏雙折射的紡錘體,這類卵母細胞ICSI后的受精率和妊娠率極低。上海偏光成像紡錘體