熒光色素:四甲基異硫氰酸羅丹明(tetramethylrhodamineisothiocyanate,TRITC),其結(jié)構(gòu)式如下所示,比較大吸收光波長為 550nm,比較大發(fā)射光波長為 620nm,呈現(xiàn)出橙紅色熒光。和 FITC 的翠綠色熒光形成鮮明對比,能夠配合用于雙重標(biāo)記或者對比染色。它的異硫氰基能夠和蛋白質(zhì)相結(jié)合,不過熒光效率比較低。免疫熒光技術(shù)也被稱作熒光抗體技術(shù),屬于標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展相對較早的一種。很早的時候就有一些學(xué)者嘗試把抗體分子與某些示蹤物質(zhì)進(jìn)行結(jié)合,借助抗原抗體反應(yīng)來對組織或細(xì)胞內(nèi)的抗原物質(zhì)進(jìn)行定位,而該技術(shù)就是在此基礎(chǔ)上建立起來的一項技術(shù)。免疫細(xì)胞研究產(chǎn)品適用于細(xì)胞核仁相關(guān)染色質(zhì)研究。cyclinD1免疫組化
在基礎(chǔ)細(xì)胞生物學(xué)研究中,這兩種技術(shù)發(fā)揮著不可替代的作用。傳統(tǒng)的單標(biāo)記免疫熒光只能呈現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)一種抗原的分布情況,而多重免疫熒光和多色免疫熒光可以同時標(biāo)記多種抗原。例如,在研究細(xì)胞的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路時,我們可以用不同顏色的熒光標(biāo)記信號通路中的不同蛋白分子。假設(shè)用綠色熒光標(biāo)記受體蛋白,紅色熒光標(biāo)記下游的激酶蛋白,藍(lán)色熒光標(biāo)記轉(zhuǎn)錄因子這不僅**提高了研究效率,而且能夠更準(zhǔn)確地揭示細(xì)胞內(nèi)復(fù)雜的分子調(diào)控機(jī)制。在腫瘤細(xì)胞的研究中,其價值更是凸顯。腫瘤細(xì)胞具有多種異常表達(dá)的蛋白,多重免疫熒光和多色免疫熒光能夠同時檢測這些蛋白的表達(dá)和定位。以乳腺*細(xì)胞為例,我們可以用一種顏色標(biāo)記雌***受體(ER),另一種顏色標(biāo)記人表皮生長因子受體-2(HER-2),還有一種顏色標(biāo)記增殖相關(guān)蛋白Ki-67。這樣,病理學(xué)家就能在一張切片上清晰地看到這三種與乳腺*診斷、***和預(yù)后密切相關(guān)的蛋白在腫瘤細(xì)胞中的表達(dá)狀態(tài)。這有助于更精細(xì)地對乳腺*進(jìn)行分型,為制定個性化的***方案提供依據(jù)。如果ER和HER-2表達(dá)陽性,且Ki-67高表達(dá),可能提示腫瘤細(xì)胞增殖活躍,需要更積極的***措施。CD20免疫熒光IF我們的免疫熒光試劑經(jīng)過嚴(yán)格的功能驗證。
在自身免疫性甲狀腺疾病的研究中,例如橋本甲狀腺炎,多重免疫組化可以同時標(biāo)記甲狀腺組織中的自身抗體標(biāo)志物,如甲狀腺過氧化物酶抗體(TPOAb)、甲狀腺球蛋白抗體(TgAb)的抗原,同時標(biāo)記甲狀腺細(xì)胞標(biāo)志物,如甲狀腺球蛋白(Tg),以及甲狀腺內(nèi)的免疫細(xì)胞標(biāo)志物,如 CD4 + T 細(xì)胞、CD8 + T 細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等。TPOAb 和 TgAb 在橋本甲狀腺炎患者中水平升高,通過觀察這些標(biāo)志物在甲狀腺組織中的分布和相互關(guān)系,可以了解自身抗體是如何攻擊甲狀腺細(xì)胞,導(dǎo)致甲狀腺功能減退的。
免疫熒光技術(shù)主要是依據(jù)抗原抗體反應(yīng)的基本原理來實施的。具體而言,就是首先將已知的抗原或抗體精心標(biāo)記上熒光素,進(jìn)而制作成熒光抗體,然后再把這種熒光抗體(或者抗原)當(dāng)作極為靈敏的探針,去對組織或細(xì)胞內(nèi)的相應(yīng)抗原(或抗體)展開檢測。在組織或細(xì)胞內(nèi)所形成的抗原抗體復(fù)合物上面含有被標(biāo)記的熒光素,當(dāng)利用熒光顯微鏡來仔細(xì)觀察標(biāo)本時,熒光素會在受到外來激發(fā)光的強(qiáng)烈照射下,發(fā)出異常明亮的熒光(呈現(xiàn)出充滿生機(jī)的黃綠色或鮮艷的橘紅色),通過這樣的方式,就能夠清晰地看見熒光所在的組織細(xì)胞,從而得以準(zhǔn)確地確定抗原或抗體的性質(zhì)、精細(xì)地進(jìn)行定位,并且還能夠借助定量技術(shù)來精確測定其含量。比如說,在一些對于信號分析有著極高要求的科學(xué)研究中,免疫熒光檢測的定量熒光信號能力能夠幫助研究者精細(xì)地量化各種細(xì)微變化,獲取到關(guān)鍵的數(shù)據(jù)信息;其復(fù)用能力在面對復(fù)雜的生物樣本中多種蛋白質(zhì)需要同時檢測的情況時,能夠高效地完成任務(wù),提供完整的分析結(jié)果;而熒光染料的光穩(wěn)定性使得即使在長時間的實驗過程中,依然能夠保證熒光信號的穩(wěn)定和清晰,確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。運用免疫熒光雙標(biāo),詳析雙成分在細(xì)胞的角色,助力學(xué)術(shù)突破。
免疫組化在***性疾病的診斷中是一種強(qiáng)大的技術(shù)手段。在某些***性疾病中,病原體的檢測和鑒定可能面臨挑戰(zhàn),尤其是當(dāng)病原體難以培養(yǎng)或者存在形態(tài)相似的病原體時。例如在結(jié)核病的診斷中,雖然傳統(tǒng)的抗酸染色可以檢測到結(jié)核分枝桿菌,但免疫組化能夠更特異性地識別結(jié)核桿菌抗原。這對于那些結(jié)核桿菌含量較低或者存在混合***的病例非常有用。免疫組化可以在組織切片上直接顯示結(jié)核桿菌的存在,確定***的部位和范圍,為臨床***提供更準(zhǔn)確的信息。在病毒***方面,如人**瘤病毒(HPV)引起的宮頸病變。免疫組化可以檢測HPV***后細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生的特異性蛋白,判斷HPV***的類型和***細(xì)胞的狀態(tài)。這有助于醫(yī)生評估宮頸病變的嚴(yán)重程度,是*為炎癥還是已經(jīng)發(fā)展為*前病變或者宮頸*,從而決定采取何種***措施,如觀察、藥物***或者手術(shù)***。免疫組化產(chǎn)品,助力解析組織病理的神秘密碼。X Hu Nuclei免疫抗體
免疫細(xì)胞研究產(chǎn)品適用于細(xì)胞黏附研究。cyclinD1免疫組化
免疫熒光在神經(jīng)退行性疾病研究中具有廣泛的應(yīng)用,為解開這些疾病的謎團(tuán)提供了重要手段。在阿爾茨海默病的研究中,免疫熒光可用于標(biāo)記β-淀粉樣蛋白(Aβ)和tau蛋白。Aβ的沉積和tau蛋白的過度磷酸化是阿爾茨海默病的主要病理特征。通過免疫熒光,可以觀察到Aβ斑塊和tau蛋白纏結(jié)在大腦組織中的分布情況。這有助于研究人員深入了解阿爾茨海默病的發(fā)病機(jī)制,探索疾病的早期診斷方法,以及評估潛在***藥物對這些病理特征的影響。在帕金森病的研究中,免疫熒光可以標(biāo)記α-突觸**白。α-突觸**白的聚集形成路易小體是帕金森病的重要病理標(biāo)志。通過免疫熒光觀察α-突觸**白在神經(jīng)元中的聚集情況,能夠研究帕金森病的神經(jīng)元損傷機(jī)制,以及尋找可能的干預(yù)靶點。cyclinD1免疫組化