在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,PCR技術(shù)是基因擴(kuò)增的重要工具,而Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 則是結(jié)合了高保真性和便捷性的理想選擇。這種預(yù)混液不僅繼承了Pfu DNA聚合酶的重要的保真性,還通過添加熒光染料,為實(shí)驗(yàn)提供了更直觀的監(jiān)測手段。Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液,含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及用于實(shí)時監(jiān)測的熒光染料。Pfu DNA聚合酶以其高保真性著稱,其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過程中糾正錯誤摻入的堿基,提高擴(kuò)增產(chǎn)物的準(zhǔn)確性。與普通Taq酶相比,Pfu酶的錯誤率更低,使其成為基因克隆、突變分析和測序準(zhǔn)備等高精度實(shí)驗(yàn)的優(yōu)先工具。熒光染料的加入是該預(yù)混液的一大亮點(diǎn)。這種染料能夠在PCR過程中實(shí)時監(jiān)測DNA的擴(kuò)增情況,通過熒光信號的強(qiáng)度變化反映目標(biāo)基因的擴(kuò)增程度。實(shí)驗(yàn)人員無需額外添加染料或進(jìn)行復(fù)雜的后處理,即可直接在PCR儀上觀察擴(kuò)增曲線,從而實(shí)現(xiàn)快速、準(zhǔn)確的定量分析。這種設(shè)計不僅節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時間,還減少了人為操作帶來的誤差。此外,Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 的2倍濃度設(shè)計進(jìn)一步簡化了實(shí)驗(yàn)操作。實(shí)驗(yàn)人員只需加入模板DNA和引物,即可直接進(jìn)行反應(yīng),減少了手動配制反應(yīng)體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差。
SYBR Green qPCR Mix (2×, UDG Plus):高效防污染的實(shí)時定量PCR解決方案SYBR Green qPCR Mix (2×, UDG Plus) 是一種為實(shí)時熒光定量PCR(qPCR)設(shè)計的2×預(yù)混液,結(jié)合了SYBR Green I熒光染料和尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)技術(shù),能夠有效防止PCR產(chǎn)物污染,提高檢測的特異性和準(zhǔn)確性。產(chǎn)品特點(diǎn)高特異性和靈敏度:采用抗體修飾的熱啟動Taq DNA聚合酶,結(jié)合優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液,有效減少非特異性擴(kuò)增,提高檢測靈敏度。防污染設(shè)計:預(yù)混液中包含UDG酶和dUTP,可在PCR反應(yīng)前降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,防止交叉污染。通用性:含有ROX被動參考染料,適用于所有qPCR儀器,無需根據(jù)儀器調(diào)整ROX濃度??梢暬聚櫍翰糠之a(chǎn)品含有藍(lán)色示蹤染料,加入模板后顏色變化可防止加樣錯誤。應(yīng)用場景基因表達(dá)分析:用于定量檢測基因表達(dá)水平。病原體檢測:快速檢測病毒、細(xì)菌等病原體的DNA。多重檢測:可在同一反應(yīng)中同時檢測多個目標(biāo)基因。SYBR Green qPCR Mix (2×, UDG Plus) 以其高效、特異和防污染的特點(diǎn),成為分子生物學(xué)研究和臨床檢測中的重要工具,尤其適用于需要高靈敏度和防污染的qPCR實(shí)驗(yàn)。Recombinant Mouse IGFBP-3R Protein,hFc TagCas9 NLS與CRISPR/Cas9系統(tǒng)中的gRNA兼容,可以進(jìn)行位點(diǎn)特異性的DNA切割 。
一、產(chǎn)品特點(diǎn)(一)低 ROX 參考染料設(shè)計Probe qPCR Mix (2×, Low ROX) 專為基于探針的 qPCR 實(shí)驗(yàn)設(shè)計,其低濃度的 ROX 參考染料是其特點(diǎn)。在多色熒光 qPCR 實(shí)驗(yàn)中,ROX 作為被動參考染料用于校正孔間熒光信號的差異。然而,過高的 ROX 濃度可能會干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,導(dǎo)致背景熒光過高或影響其他熒光信號的檢測靈敏度。該產(chǎn)品通過精確調(diào)控 ROX 濃度,使其在保證校正功能的同時,降低對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾,為多色熒光檢測提供了穩(wěn)定可靠的背景環(huán)境。(二)2×預(yù)混體系作為一款 2×濃度的預(yù)混液,Probe qPCR Mix (2×, Low ROX) 在使用時只需與模板和引物等反應(yīng)組分等體積混合即可進(jìn)行反應(yīng),極大地簡化了實(shí)驗(yàn)操作流程。這種預(yù)混體系不僅節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時間,還減少了因手動配制反應(yīng)體系而引入的誤差,提高了實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和準(zhǔn)確性。同時,其優(yōu)化的配方確保了反應(yīng)體系在不同實(shí)驗(yàn)條件下的穩(wěn)定性和兼容性,無論是對常規(guī)的基因表達(dá)分析,還是對復(fù)雜樣本的病原體檢測,都能提供可靠的性能保障。
高靈敏度與特異性該試劑采用了優(yōu)化的反應(yīng)緩沖體系和抗體修飾的熱啟動Taq DNA聚合酶,能夠顯著提高擴(kuò)增效率和特異性。即使在低拷貝數(shù)的模板條件下,也能實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定檢測,例如某些產(chǎn)品可在3 copies/反應(yīng)的水平下實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定檢出。此外,該試劑還通過添加抑制非特異性擴(kuò)增的因子,進(jìn)一步提升了多重反應(yīng)的準(zhǔn)確性。2. 高效的多重檢測能力Multiplex Probe qPCR Mix (2×, UDG Plus) 支持在同一反應(yīng)體系中進(jìn)行多達(dá)四重的靶基因檢測。這種多重檢測能力極大地提高了實(shí)驗(yàn)效率,減少了樣本用量和檢測時間,特別適用于需要同時檢測多個基因或病原體的場景。3. 強(qiáng)大的防污染系統(tǒng)試劑中包含的dUTP/UDG系統(tǒng)能夠有效防止PCR產(chǎn)物的氣溶膠污染,從而避免假陽性結(jié)果的出現(xiàn)。UDG酶在室溫下即可發(fā)揮作用,確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性。4. 快速擴(kuò)增與操作簡便該試劑支持快速擴(kuò)增程序,可在短時間內(nèi)完成qPCR反應(yīng),例如某些產(chǎn)品可在35分鐘內(nèi)完成45個循環(huán)。同時,2×預(yù)混液的設(shè)計使得實(shí)驗(yàn)操作更加簡便,只需加入模板、引物和探針即可進(jìn)行反應(yīng)。Hot-Start Taq Master Mix (2×) (Without Dye) 結(jié)合了熱啟動技術(shù)和無染料設(shè)計,提供了可靠的解決方案。
在分子生物學(xué)研究中,核酸染料是檢測DNA和RNA的重要工具。然而,傳統(tǒng)的溴化乙錠(EB)染料因其劇毒性和致病,逐漸被更安全的替代品所取代。GoldenView 吖啶橙核酸染料作為一種新型的核酸染料,憑借其性能和安全性,成為科研工作者的理想選擇。GoldenView 吖啶橙核酸染料的成分是吖啶橙,這是一種細(xì)胞滲透性熒光染料,能夠與核酸結(jié)合并發(fā)出熒光信號。其獨(dú)特的熒光特性使其在檢測雙鏈DNA(dsDNA)時呈現(xiàn)綠色熒光(530 nm),而在與單鏈DNA(ssDNA)或RNA結(jié)合時則發(fā)出紅色熒光(640 nm)。這種雙重?zé)晒馓匦圆粌H提高了檢測的靈敏度,還為研究人員提供了更豐富的信息。在瓊脂糖凝膠電泳中,GoldenView 吖啶橙核酸染料表現(xiàn)出與EB相當(dāng)?shù)撵`敏度,能夠清晰地檢測到大片段(>1 kb)的DNA。此外,該染料的使用方法與EB完全相同,無需改變現(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)流程,即可輕松替換傳統(tǒng)染料。安全性是GoldenView 吖啶橙核酸染料的另一大優(yōu)勢。與EB不同,GoldenView 經(jīng)過多項(xiàng)致突變性試驗(yàn)驗(yàn)證,結(jié)果均為陰性,表明其對細(xì)胞和環(huán)境更為安全。這種低毒性特性使其在實(shí)驗(yàn)室中使用更為便捷,同時降低了對研究人員健康的潛在風(fēng)險。其耐血能力可達(dá)20%-50%,在20 μL的PCR體系中,通??杉尤?-4 μL的全血樣本。Recombinant Human GFR alpha 1 Protein,His Tag
該預(yù)混液能夠擴(kuò)增長達(dá)5 kb的DNA片段,并且對不同抗凝劑處理的血液樣本均表現(xiàn)出良好的兼容性。Recombinant Biotinylated Human IL-17F Protein,His-Avi Tag
Taq DNA聚合酶:分子生物學(xué)的“明星酶”Taq DNA聚合酶是一種從嗜熱菌Thermus aquaticus中分離得到的耐熱性DNA聚合酶,因其獨(dú)特的耐高溫特性和高效的DNA合成能力,成為分子生物學(xué)領(lǐng)域不可或缺的工具。該酶在PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)中發(fā)揮著重要作用,極大地推動了基因擴(kuò)增、測序和診斷技術(shù)的發(fā)展。Taq DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性,但缺乏3'→5'外切酶活性,這使得它在DNA合成過程中能夠快速延伸引物,同時在PCR產(chǎn)物的3'端添加一個突出的A堿基,便于后續(xù)的克隆操作。此外,Taq酶的耐熱性使其能夠在PCR的高溫變性步驟中保持穩(wěn)定,從而實(shí)現(xiàn)高效的循環(huán)擴(kuò)增。近年來,科學(xué)家們通過對Taq DNA聚合酶的改造和優(yōu)化,開發(fā)出多種突變體,以滿足不同的實(shí)驗(yàn)需求。例如,Klentaq1突變體具有更高的耐熱性和保真性,適用于長片段PCR擴(kuò)增。此外,Taq酶的5'外切酶活性還被用于開發(fā)新型的多重PCR檢測技術(shù),如“MeltArray”技術(shù),實(shí)現(xiàn)了在單次反應(yīng)中檢測多個靶點(diǎn)。Taq DNA聚合酶的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用不僅極大地簡化了DNA擴(kuò)增的流程,還為基因診斷、遺傳病檢測和個性化醫(yī)療等領(lǐng)域提供了強(qiáng)大的技術(shù)支持。Recombinant Biotinylated Human IL-17F Protein,His-Avi Tag