斑馬魚胚胎的內(nèi)分泌系統(tǒng)高度敏感,使其成為檢測環(huán)境雌jisu的“生物探針”。丹麥技術(shù)大學(xué)團隊開發(fā)了基于斑馬魚胚胎的雌二醇響應(yīng)報告系統(tǒng),通過將雌jisu受體α(ERα)基因與熒光素酶編碼序列融合,構(gòu)建出可在水體中檢測微量雌jisu的轉(zhuǎn)基因品系。實驗顯示,該系統(tǒng)對17β-雌二醇的檢測限低至0.01ng/L,較傳統(tǒng)ELISA法靈敏度提升100倍。利用該技術(shù),研究團隊在污水處理廠出水口檢測到納克級雙酚A殘留,揭示了傳統(tǒng)處理工藝的局限性。在多環(huán)芳烴(PAHs)污染評估中,斑馬魚胚胎的芳烴受體(AhR)信號通路展現(xiàn)出獨特優(yōu)勢。法國國家科學(xué)研究中心團隊發(fā)現(xiàn),PAHs暴露可使斑馬魚胚胎肝臟區(qū)域CYP1A酶活性在6小時內(nèi)上調(diào)20倍,且該響應(yīng)與PAHs的致ancer性呈劑量依賴關(guān)系。通過構(gòu)建AhR信號通路的數(shù)學(xué)模型,可預(yù)測不同PAHs混合物的聯(lián)合毒性,較傳統(tǒng)毒性當(dāng)量因子法準(zhǔn)確率提升35%。該技術(shù)已應(yīng)用于渤海灣近岸海域污染監(jiān)測,成功識別出多個PAHs污染熱點區(qū)域。斑馬魚與基因編輯在腦科學(xué)研究的應(yīng)用。高通量儀器
魚類的性腺發(fā)育和繁殖行為受到下丘腦-垂體-性腺軸(HPG軸)的調(diào)控。下丘腦排泄促進性腺開釋元素(GnRH),其作用于腦垂體,影響其排泄促黃體生成素(LH)和促卵泡素(FSH),這兩種通過血液循環(huán)與相應(yīng)的受體結(jié)合后作用于性腺,影響性腺產(chǎn)生睪酮(T)、17β-雌二醇(E2)和11-酮基睪酮(11-KT)等類固醇,從而使精子和卵子的發(fā)育和成熟。行為研討魚類行為軌跡的盯梢和量化研討中描繪的一切魚類行為測驗都用攝像機(SONYHandycam,FDR-AX60,Japan)進行了錄像,并運用動物行為盯梢軟件VisuTrack動物行為剖析軟件進行了離線剖析。單個空間實際上被一個內(nèi)圓分紅兩個部分。(b)游程(cm),平均速度(cm/s),以及斑馬魚、medaka和我國鰷魚在openfieldtank的“中心”和“周圍”區(qū)域所花費的時刻(s)。(c)新式水槽(側(cè)面)示意圖。(d)魚在上午(9:00)和晚上(21:00)在不同區(qū)域所花費的時刻(%)。安徽斑馬魚實驗基因突變斑馬魚作為模式生物,在藥物研發(fā)、毒理學(xué)及疾病模型研究中具有不可替代作用。
斑馬魚為tumor研究開辟了新的途徑,其獨特的生物學(xué)特性使tumor發(fā)生的發(fā)展機制的研究更加直觀和深入。斑馬魚的免疫系統(tǒng)和tumor微環(huán)境與人類具有一定的相似性,并且能夠通過基因編輯技術(shù)構(gòu)建多種tumor模型,如黑色素瘤、白血病等。在斑馬魚黑色素瘤模型中,通過將人類黑色素瘤相關(guān)基因?qū)氚唏R魚胚胎,能夠誘導(dǎo)斑馬魚產(chǎn)生黑色素瘤,研究人員可以實時觀察tumor細胞的增殖、遷移和侵襲過程。此外,斑馬魚胚胎透明的特點使得利用活的體成像技術(shù)追蹤tumor細胞的動態(tài)變化成為可能,能夠清晰地看到tumor細胞與周圍組織的相互作用以及血管生成等過程。通過對斑馬魚tumor模型的研究,發(fā)現(xiàn)了許多參與tumor發(fā)生的發(fā)展的關(guān)鍵信號通路和調(diào)控因子,為tumor的診斷和醫(yī)療提供了新的靶點和思路,同時也有助于評估新型抗tumor藥物的療效和毒性。
關(guān)于雌性斑馬魚而言,產(chǎn)卵量是點評其繁殖力的常用生物目標(biāo),它與魚類繁殖過程中的多個環(huán)節(jié)(卵子發(fā)育、雌雄交配行為、性元素刺激等)相關(guān),并對環(huán)境化學(xué)物質(zhì)具有高敏感性,能直接反應(yīng)魚類繁殖力變化。環(huán)境化學(xué)物質(zhì)除了直接對親代斑馬魚的生殖系統(tǒng)形成損害,還可能對其子代的正常生長發(fā)育。卵黃蛋白原在斑馬魚雌魚老練過程中發(fā)揮重要作用,老練雌魚在體內(nèi)17β-雌二醇的刺激下,由肝臟組成的VTG經(jīng)過血液抵達卵巢并加工成卵黃蛋白,促進性腺發(fā)育。幼魚和雄魚在正常情況下不組成VTG,但在遭到雌元素和類雌元素刺激時能組成VTG,導(dǎo)致魚體內(nèi)VTG濃度升高,呈現(xiàn)雌性體征。斑馬魚心臟再生能力強,是研究心血管修復(fù)機制的理想動物模型。
斑馬魚胚胎作為水生生態(tài)毒性的“生物傳感器”,其急性毒性實驗已成為國際標(biāo)準(zhǔn)化組織(ISO)認(rèn)證的污染檢測方法。新加坡國立大學(xué)開發(fā)的轉(zhuǎn)基因斑馬魚品系,通過在雌jisu受體基因啟動子后連接熒光蛋白編碼序列,構(gòu)建出可實時監(jiān)測水體中甾類jisu污染的“活的人體檢測儀”。實驗數(shù)據(jù)顯示,當(dāng)水體中雙酚A濃度達到0.1μg/L時,斑馬魚胚胎下丘腦區(qū)域熒光強度即可增加3倍,較傳統(tǒng)化學(xué)分析法靈敏度提升兩個數(shù)量級。該技術(shù)已應(yīng)用于長江流域重點河段的內(nèi)分泌干擾物監(jiān)測,成功預(yù)警多起工業(yè)廢水違規(guī)排放事件。斑馬魚繁殖迅速,遺傳學(xué)實驗利用此特性,短期內(nèi)構(gòu)建多樣基因模型,加速遺傳規(guī)律探尋。新疆國內(nèi)斑馬魚實驗室
斑馬魚行為學(xué)剖析體系。高通量儀器
在飼養(yǎng)體系里,科研人員們會準(zhǔn)確調(diào)控水的溫度、電導(dǎo)率等參數(shù),并設(shè)定固定的日常光照時刻,以保證斑馬魚能在實驗室內(nèi)大規(guī)模繁育,確保實驗的有序進行。儀器設(shè)備實驗室除了先進的飼養(yǎng)體系,還具有了先進的正置熒光顯微鏡、熒光定量PCR儀、熒光酶標(biāo)儀、斑馬魚行為分析儀等檢測設(shè)備。斑馬魚成魚體長5cm左右,其胚胎通明,在受精72h后完結(jié)孵化,并在孵出后3個月內(nèi)性成熟。成年斑馬魚的繁衍周期短(一般7d左右),若條件適宜,成年雌性斑馬魚可定期產(chǎn)卵(每次200~300個)。在斑馬魚的前期胚胎及幼體的發(fā)育過程中,尚無性別分解,原始性腺都是相同的且具有雙向發(fā)育的潛能,易受環(huán)境(溫度、光照、pH值等)因素的影響而改變其遺傳性別。高通量儀器